113 高普考高考二級 植物病蟲害防治 植物病理學與植物病原微生物學研究 考古題詳解

113 年・高普考・高考二級・植物病蟲害防治
試題代碼 植物病理學與植物病原微生物學研究

第 一 題20 分

請說明下列植物病理學名詞:(每小題 4 分,共 20 分)

(1) Alarm signal

(2) Pseudothecium

(3) RNAi

(4) Attacins

(5) Ontogenic resistance

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**核心觀念:**植物受病原菌、害蟲或傷害刺激後,會產生或釋放訊號分子,通知受害部位及其他組織啟動防禦反應。此類訊號稱為警戒訊號(alarm signal)。它的作用像警報,將局部受害資訊傳遞出去,促使植物調整防禦基因表現、累積防禦物質,或建立系統性抗性。

**解題方法:**答題時抓住「受害刺激—訊號傳遞—防禦反應」三個環節,並舉出植物防禦訊號的例子。水楊酸(salicylic acid, SA)常與病原菌防禦及系統性獲得抗性(systemic acquired resistance, SAR)相關;茉莉酸(jasmonic acid, JA)及乙烯(ethylene)也參與防禦訊息傳遞。受害植物釋出的水楊酸甲酯(methyl salicylate, MeSA)等揮發性物質,亦可傳遞警戒訊息。

**解題技巧:**不要只把 alarm signal 寫成某一種固定化合物;此詞著重的是「傳遞受害訊息、引發防禦」的功能。列舉訊號分子時,應說明其功能脈絡。

(2)Pseudothecium(假子囊殼)

**核心觀念:**假子囊殼是子囊菌的有性生殖構造,常見於過去稱為腔菌類(Loculoascomycetes)的類群。其子囊形成於真菌基質(stroma)內的腔室,該腔室稱為子囊腔(locule);典型者具有雙層壁子囊(bitunicate ascus),成熟時可伸展並釋放子囊孢子。

**解題方法:**依「外部基質、內部腔室、腔室中形成子囊」描述其構造,再以雙層壁子囊補足辨識特徵。以蘋果黑星病菌 Venturia inaequalis 為相關例子。

**解題技巧:**容易與瓶狀子囊殼(perithecium)混淆。作答時點出假子囊殼的子囊位於基質內的子囊腔,以及典型的雙層壁子囊,即能表達主要區別。

(3)RNAi(RNA interference,RNA 干擾)

**核心觀念:**RNA 干擾是由小 RNA 引導、具有序列專一性的基因沉默機制。雙股 RNA(dsRNA)經 Dicer 或植物中的 Dicer-like 蛋白切割成小干擾 RNA(siRNA)或微小 RNA(miRNA);小 RNA 的引導股與 Argonaute(AGO)結合,組成 RNA 誘導沉默複合體(RISC),辨識互補的目標 RNA,使其被切割、降解或抑制轉譯。植物 RNAi 也可參與轉錄層次的基因沉默。

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第 二 題20 分

請詳述 Phytophthora cinnamomi、Phytophthora infestans、Phytophthora litchii 及 Phytophthora ramorum 之孢子囊梗(sporangiophore)的形態特徵為何?主要感染植物之部位為何?

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核心觀念

本題考查四種疫病菌的孢子囊梗分枝型態與辨識特徵,並要求連結其病原生態,指出主要侵染的植物部位。孢子囊梗是著生孢子囊的菌絲分枝;辨識時可比較是否分枝、分枝方式、孢子囊脫落後的梗部特徵,以及是否呈現類似霜黴菌的分枝外觀。

題目所列名稱依植物病理學慣用分類作答;Phytophthora litchii 亦常見舊名 Peronophythora litchii。

解題方法

先以孢子囊梗形態區分四種病原,再各自配對其主要病害部位:

  • P. cinnamomi:梗多簡單、不分枝或疏鬆合軸分枝;對應土壤傳播、以根部為主的病害。
  • P. infestans:複合合軸分枝,分枝處具特徵性膨大;對應馬鈴薯、番茄地上部,以及馬鈴薯塊莖。
  • P. litchii:具二叉分枝小枝、外觀似霜黴菌;對應荔枝花序、幼果及果實。
  • P. ramorum:孢子囊梗單生或合軸分枝;對應木本植物的葉片、嫩枝等地上部,部分寄主也形成樹幹潰瘍。

四種病原比較

病原孢子囊梗形態特徵主要感染部位
Phytophthora cinnamomi多為簡單、不分枝的梗;也可見疏鬆的合軸分枝。孢子囊可在梗上內生增殖,梗本身不像 P. infestans 有明顯的特徵性膨大。主要侵染根部,尤其吸收根、細根及根冠附近組織;可由根皮層向中柱擴展。
Phytophthora infestans孢子囊梗細長、分枝,呈複合合軸分枝,梗軸可繼續生長;孢子囊脫落後,著生位置常留有特徵性小膨大。主要侵染馬鈴薯與番茄的葉片、葉柄及莖;馬鈴薯塊莖亦可受侵染。
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第 三 題25 分

何謂 ISPM?請說明現有 ISPM 2 對於有害生物風險分析的流程架構,並舉例說明在哪些情境下,可能啟動有害生物風險分析。

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核心觀念

ISPM 是 International Standards for Phytosanitary Measures 的縮寫,中文為「國際植物防疫措施標準」,由《國際植物保護公約》(IPPC)架構下制定。ISPM 2 全名為「有害生物風險分析架構」(Framework for Pest Risk Analysis),說明 IPPC 範圍內有害生物風險分析(PRA)的整體架構,並特別著重於分析如何啟動。

有害生物風險分析是依據生物學及其他科學、經濟資料,判斷某有害生物是否屬檢疫有害生物、是否應予管制,以及評估可採取的植物防疫措施。依 IPPC 用語,「有害生物」涵蓋對植物或植物產品有害的植物、動物或病原性因子。

**法規與標準基準:**本題依民國 113 年命題時適用的 ISPM 2 架構作答。ISPM 是國際標準,並非我國法律條文;ISPM 2 的架構由三個階段組成。

解題方法:依三階段說明流程

作答時先列出 PRA 的三階段,再交代各階段的主要任務。流程為:

第一階段:啟動⟶第二階段:有害生物風險評估⟶第三階段:有害生物風險管理\text{第一階段:啟動} \longrightarrow \text{第二階段:有害生物風險評估} \longrightarrow \text{第三階段:有害生物風險管理}

第一階段:啟動(Initiation)

啟動階段要界定分析的理由、對象及範圍,回答「為什麼分析、分析哪些有害生物或途徑、針對哪個地區分析」。依分析起點,可概分為:

  1. **以途徑啟動:**辨識一條可能引入或傳播有害生物的途徑,例如進口植物、植物產品、包裝材料或其他貨物。
  2. **以有害生物啟動:**發現或辨識某有害生物,須判斷其是否具有檢疫關切。
  3. **以政策檢討啟動:**因植物防疫政策或優先事項檢討、修訂而重新分析。

啟動後,需界定 PRA 區域、分析對象與範圍,蒐集初步資料,並決定是否進入後續評估。若初步界定後沒有適用的檢疫關切,分析可在此階段結束;若有,則進入風險評估。

第二階段:有害生物風險評估(Pest Risk Assessment)

風險評估判斷有害生物是否符合相關管制類別,並評估其進入、定殖及擴散的可能性,以及可能造成的經濟或環境影響。核心工作可整理為:

  • **有害生物分類:**確認分類身分、生物學特性、寄主範圍、分布及是否符合檢疫有害生物或其他相關類別的條件。
  • **風險評估:**評估引入途徑、進入與定殖的可能性、傳播潛力及可能後果,並考量不確定性。
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第 四 題20 分

請回答以下真菌之問題:(每小題 4 分,共 20 分)

(1) Verticillium dahliae 造成之病害類型、其休眠結構,及最主要之病害傳播方式為何?

(2) 咖啡銹病菌(Hemileia vastatrix)為何會被認為應該是屬於 heteroecious,而尚未發現其中間寄主(alternate host),而不是屬於單一寄主的 autoecious?

(3) Diaporthe 屬真菌之分生孢子特色為何?

(4) 何謂分生孢子束(synnema)?

(5) 何謂 hyphal interference?

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核心觀念:考查病原菌所致病害類型、休眠構造與主要傳播途徑。此菌是土壤傳播的維管束病原菌,典型病害為維管束萎凋病(Verticillium wilt)。

**解題方法與作答:作答時依序寫出病害類型、存活構造與傳播方式。病原菌由根部侵入並在木質部定殖,引起植株萎凋等症狀;在寄主殘體及土壤中,主要以黑褐色、厚壁的微菌核(microsclerotia)**休眠存活。田間主要藉由帶菌土壤及病株殘體傳播;耕作、農機具或灌溉水移動帶菌土壤,會促成擴散。

**解題技巧:**看到 V. dahliae,聯想「土傳、維管束萎凋、微菌核」。不要把分生孢子誤列為主要休眠構造。

(2) 咖啡銹病菌 Hemileia vastatrix

**核心觀念:**考查銹菌生活史中「寄主數」的差異。**異主寄生(heteroecious)**指完成生活史須在兩種不同寄主植物上;**單主寄生(autoecious)**則是在同一寄主植物上完成生活史。

**解題方法與作答:**咖啡銹病菌已知在咖啡上形成夏孢子堆,夏孢子可反覆侵染咖啡,促成病害在田間蔓延;其冬孢子可萌發並形成擔孢子,但擔孢子尚未證實能侵染咖啡。由於擔孢子通常與銹菌生活史中的另一寄主階段相關,且該菌未見典型的性孢子器與銹孢子器階段,因此推論它可能需要尚未發現的中間寄主,故被認為可能屬於異主寄生。中間寄主仍未確認,所以這是根據孢子階段與感染特性提出的生活史推論,並非已完成證實;另有觀點認為它可能是缺少性孢子器、銹孢子器階段的單主寄生銹菌。

**解題技巧:**區分「田間主要靠夏孢子反覆傳播」與「完整生活史是否需要另一寄主」;前者不能直接證明它是單主寄生。

(3) Diaporthe 屬真菌的分生孢子

**核心觀念:**考查其無性繁殖構造及分生孢子形態。

**解題方法與作答:**典型 Diaporthe 可在分生孢子器(pycnidia)中形成兩型分生孢子:

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第 五 題15 分

請詳細說明種傳病原真菌的檢定方法為何?

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核心觀念

本題考查「種子健康檢定」中,如何從種子或其幼苗檢出種傳真菌,並依病原所在位置、是否能培養、是否會造成幼苗病徵,選擇適當方法。

**種傳(seed-borne)**指病原附著於種子表面,或存在於種皮、胚乳、胚等種子內部組織,並能隨種子傳播。檢定結果可用來評估種子帶菌情形及其傳播風險;檢出病原不必然等於種子一定會發病,因為病原活性、接種位置、環境條件與寄主感病性都會影響病害發生。

檢定時要先區分兩件事:

  • 檢出病原:確認種子是否帶有目標真菌。
  • 評估感染性或傳播能力:判斷病原是否存活、能否侵入幼苗並造成病害。

常用方法包括乾種子檢查、洗滌檢查、濾紙培養法、瓊脂培養法、胚檢查、幼苗症狀檢定,以及顯微鏡、血清或分子檢測等輔助方法。

解題方法

作答時可依「病原位置 → 檢定程序 → 可回答的問題」逐項說明。每種方法都交代樣本如何處理、如何觀察,以及其優缺點,最後指出方法須依作物與目標病原選擇。

一、乾種子外觀檢查

取具代表性的種子樣本,直接以肉眼或放大鏡觀察種子外觀,必要時剖開種子檢查內部。觀察內容包括種子變色、斑點、畸形、菌絲、孢子堆或其他病原構造。

此法快速、簡便,可先篩查外觀病徵明顯的種子;但只能檢出可見病徵或病原構造,容易漏掉尚未顯症、低密度或位於種子內部的感染,也不能單憑外觀確認病原是否仍具活性。因此,常用於初步檢查,不宜單獨作為種子健康的完整判定。

二、洗滌檢查法

將種子置於無菌水中振盪或沖洗,使附著於種子表面的孢子、菌絲碎片等脫落;再將洗液濃縮或直接取樣,以顯微鏡觀察病原形態,必要時也可將洗液接種於培養基分離病原。

此法適合檢出表面附著型病原,例如種子表面攜帶的黑穗菌孢子。優點是能直接分析種子表面帶菌情形;限制是種子內部感染通常無法藉洗滌檢出,而且孢子被檢出不代表仍有活性或必能造成病害。

三、濾紙培養法(blotter method)

將種子排列於濕潤濾紙或吸水紙上,在適當溫度、濕度與光照條件下培養,使種子所帶真菌生長、產孢,再依菌落、菌絲及孢子形態進行檢查與鑑定。

常見操作變化包括標準濾紙法及凍結處理等改良法。凍結處理可抑制種子萌芽,減少幼苗遮蔽真菌或干擾觀察的情形。此法適合檢出許多可在種子表面或周圍生長、並能產生辨識構造的真菌,材料與操作相對簡便;但不同真菌的生長、產孢需求不同,種子本身也可能發芽或滋生腐生菌,影響判讀。若只靠形態觀察,近似種可能難以區分。

四、瓊脂培養法(agar plate method)

將種子直接放置於適當瓊脂培養基上培養,觀察種子周圍真菌的生長、菌落特徵及產孢構造,再進行鑑定。常用培養基包括馬鈴薯葡萄糖瓊脂、麥芽瓊脂等,實際培養基須依目標病原選擇。

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