115 高普考普通考試 食品衛生檢驗 食品微生物學概要 考古題詳解

115 年・高普考・普通考試・食品衛生檢驗
試題代碼 食品微生物學概要

第 一 題25 分

請說明微生物二次生長(Diauxic Growth)現象,對食品發酵有何影響,請提出解決方案。

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核心觀念

微生物二次生長(diauxic growth)是微生物在含有兩種或以上可利用碳源的培養基中,因優先利用其中一種碳源,呈現「兩段生長、中間短暫停滯」的生長現象。典型例子是大腸桿菌先利用葡萄糖,待葡萄糖耗盡後,經過一段調適期再利用乳糖。

第一階段中,微生物優先代謝較易利用的碳源;該碳源的代謝產物或訊號會抑制其他碳源利用所需的酵素合成,稱為分解代謝物抑制(catabolite repression)。優先碳源耗盡後,抑制解除,微生物開始合成另一碳源的運輸與代謝酵素。這段酵素誘導與代謝調適所需時間形成二次生長曲線上的停滯期,隨後進入第二階段生長。

因此,二次生長的典型曲線包括:第一段指數生長、短暫停滯期,以及第二段指數生長。停滯期長短取決於菌種、碳源種類與濃度、培養條件,以及所需酵素的誘導時間。

解題方法與食品發酵影響

本題可依「現象定義 → 生理機制 → 發酵影響 → 製程對策」作答。題目要求說明對發酵的影響與解決方案,重點是指出二次生長會造成代謝速率與產物生成的不連續,再提出能減少碳源切換或縮短調適期的控制方法。

在食品發酵中,二次生長可能造成:

  • 發酵時間延長:優先碳源耗盡後,微生物需調整代謝並合成新酵素,停滯期會拉長批次製程。
  • 產物生成速率改變:不同碳源可能導向不同代謝途徑,使酸、醇、香氣物質或其他發酵產物的產率與比例改變。
  • 品質與批次一致性降低:碳源消耗順序、停滯期及代謝切換若受原料或操作條件影響,會造成發酵終點與風味差異。
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第 二 題25 分

請定義原生菌(Indigenous bacteria)、益生菌(Probiotics)、伺機性病原菌(Opportunistic pathogens),說明此三者在腸道之交互作用。

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核心觀念

本題考查腸道菌群的三個角色,以及腸道微生物如何共同影響宿主健康。答題時要掌握兩個重點:一是依「來源與功能」區分原生菌、益生菌及伺機性病原菌;二是說明腸道菌群透過競爭、代謝產物與宿主免疫反應,影響病原菌的定殖及致病。

名詞定義

原生菌(indigenous bacteria):自然存在並能在宿主特定部位長期或穩定定殖的細菌,亦稱常在菌。腸道原生菌是腸道常態微生物群的重要成員,與宿主維持共生或互利關係,可參與營養物質代謝、維生素生成及腸道環境維持。部分原生菌在特定情況下也可能引發疾病。

益生菌(probiotics):攝取足量時,能對宿主健康產生益處的活微生物。常見例子包括部分乳酸菌及雙歧桿菌。益生菌通常經由食物或補充品進入腸道,其作用可能包括競爭黏附位置與營養、產生抑菌物質、調節腸道菌群及影響宿主免疫反應。益生菌不一定能在腸道永久定殖,效益也須依菌種、菌株及攝取量判斷。

伺機性病原菌(opportunistic pathogens):平時致病力較低,或原本存在於環境、人體皮膚與黏膜的微生物;當宿主免疫力下降、腸道菌群失衡、腸黏膜受損,或細菌進入原本不應出現的部位時,便可能引發感染。部分腸道原生菌在條件改變時也可能成為伺機性病原菌,因此「原生菌」描述其與宿主的定殖關係,「伺機性病原菌」描述其在特定條件下的致病能力。

解題方法:由腸道菌群平衡說明三者交互作用

答題可依「正常狀態—保護機制—失衡後果」的順序說明。

正常狀態下,原生菌建立定殖抗性。 腸道原生菌占據黏膜表面及腸腔中的生存位置,消耗可利用的營養物質,並藉由代謝產物及與宿主的免疫互動,形成不利於外來病原菌生長的環境。這種限制病原菌定殖或增殖的作用稱為定殖抗性。

益生菌可協助維持或調整腸道菌群。 益生菌可能與原生菌共同競爭營養與黏附位置,產生有機酸或其他抑菌物質,並調節宿主的黏膜屏障及免疫反應,進而抑制部分病原菌或伺機性病原菌。不過,益生菌的效果具有菌株與情境差異,不能一概而論。

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第 三 題25 分

請說明以下列方式處理食品,達到延長食品保存期的機制:

(每小題 5 分,共 25 分)

(一)加酸
(二)加糖
(三)脈衝電場
(四)靜水壓
(五)乳酸鏈球菌素(Nisin)

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核心觀念

本題考食品保存的微生物控制機制:透過改變食品的酸鹼度與水分可利用性,或直接破壞微生物細胞結構、抑制細胞壁合成,降低微生物存活與繁殖,延長食品保存期。作答時要指出各方法的主要作用靶點,並說明其對微生物的抑制或致死效果。

解題方法

依序判斷每種處理改變了什麼:

  1. 加酸、加糖:改變食品環境,使微生物不易生長。
  2. 脈衝電場、靜水壓:以物理方式造成細胞損傷或失活。
  3. Nisin:以抑菌物質作用於細菌細胞膜及細胞壁合成。

各小題解析

(一)加酸

加酸降低食品的 pH,使環境不利於腐敗菌及致病菌生長。低 pH 可干擾微生物酵素活性、膜運輸及細胞內酸鹼平衡;未解離型有機酸還可穿過細胞膜,進入細胞後解離,造成細胞質酸化並增加維持內部 pH 的能量負擔,因而抑制生長,嚴重時造成失活。

食品實際酸度通常以 pH 表示,但相同 pH 的不同酸性食品,抑菌效果仍會受酸種類、可滴定酸度、食品緩衝能力及微生物耐酸性影響。加酸能延長保存期,卻不等於滅菌;耐酸微生物或其孢子仍可能存活。

(二)加糖

加糖提高食品中溶質濃度,降低水活性 awa_w,使微生物可利用的水分減少。高糖環境也會造成食品外部滲透壓升高,水分由微生物細胞移出,細胞脫水、質壁分離,生長與代謝受到抑制。

需區分水活性與總含水量:食品即使含有水,水分若被糖結合或受高滲透壓影響,仍不容易供微生物利用。加糖主要是抑制作用,耐糖酵母及耐滲透壓黴菌仍可能生長,因此常需搭配加熱、密封或其他保存方法。

(三)脈衝電場

脈衝電場(pulsed electric fields, PEF)以短時間、高電場強度的電脈衝處理食品。電場使微生物細胞膜產生跨膜電位;當膜所受電位超過臨界值時,膜上形成孔洞,稱為電穿孔(electroporation)。

電穿孔會增加細胞膜通透性,使離子與細胞內物質外漏,破壞離子梯度與膜功能,導致微生物失活。效果受電場強度、脈衝數與時間、食品導電度及微生物種類影響。PEF 常用於液態或可泵送食品,具有處理時間短、熱負荷較低的特性;但細菌孢子通常比營養細胞耐受,PEF 不可直接視為可確保商業滅菌的處理。

(四)靜水壓

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第 四 題25 分

請比較黴菌孢子與細菌孢子之差異。

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核心觀念

本題考比較黴菌的繁殖孢子與食品微生物學常稱的細菌「芽孢」(內生孢子,endospore)。關鍵在於:黴菌孢子主要用於繁殖與散布;細菌芽孢主要用於抵抗逆境、延續生存,並非繁殖構造。

黴菌可形成有性孢子或無性孢子;細菌芽孢則是部分細菌在不利環境下形成的休眠型態,常見於 Bacillus 與 Clostridium 等屬。

解題方法

以孢子的功能、形成方式、結構、耐受性與萌發結果逐項比較。回答時須特別說明兩者雖都稱為「孢子」,生物學上的作用並不相同;食品衛生上討論細菌孢子時,通常指芽孢。

黴菌孢子與細菌芽孢比較

比較項目黴菌孢子細菌芽孢(內生孢子)
主要功能繁殖、散布,部分也有助於度過不利環境抵抗不良環境、維持生存;不是繁殖構造
形成方式可經有性或無性生殖形成;依種類在菌絲、孢子囊或特化構造上形成部分細菌於營養不足等逆境下,在母細胞內形成一個芽孢
形成後的數量意義一個孢子萌發可形成菌絲,進而長成菌落;大量產孢有繁殖與擴散作用一個營養細胞形成一個芽孢,芽孢萌發後成為一個營養細胞;沒有增加細胞數的繁殖效果
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