110 高普考高考三級 園藝 園藝作物繁殖與育種學 考古題詳解

110 年・高普考・高考三級・園藝
試題代碼 園藝作物繁殖與育種學

第 一 題30 分

請解釋並比較下列名詞:(每小題 6 分,共 30 分)

(一) Complementary gene and Supplementary gene

(二) Monoecious and Dioecious

(三) Penetrance and Expressivity

(四) Multiple allele and Polygene

(五) Differentiation and Cyto-differentiation

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核心觀念

本題考查遺傳學中的基因作用與性狀表現,以及植物生長發育的分化概念。作答時應抓住各組名詞的定義、基因作用方式或生物層次,再以對照方式說明差異。

解題方法

每小題先界定兩個名詞,再指出它們的關係與判別重點。遺傳學名詞可從「基因座數目、基因間作用、表現變異」切入;植物發育名詞則從「細胞或組織是否產生功能差異,以及是否伴隨細胞質變化」切入。

(一)Complementary gene 與 Supplementary gene

**互補基因(complementary gene)**是指兩對或多對非等位基因共同作用,缺少其中任一對的顯性基因,目標性狀便無法表現;各基因的功能彼此互補。典型情形是兩對基因都須有顯性等位基因,才形成某種表型。若基因型為 A_B_A\_B\_ 才呈現該性狀,A_bbA\_bb、aaB_aaB\_、aabbaabb 均呈另一表型,則 AaBbAaBb 自交的表型分離比為 9:79:7。

**補充基因(supplementary gene)**是指一對基因先決定基本性狀,另一對基因的顯性基因再對基本性狀加以補充或修飾;後者單獨存在時通常不會形成該補充表現。若只有 A_B_A\_B\_ 呈現補充後的表型,而 A_bbA\_bb、aaB_aaB\_、aabbaabb 合併呈另一表型,常見分離比也是 9:79:7。因此,不能只憑分離比區分兩者,須看基因功能的描述:互補基因強調兩基因共同完成性狀形成;補充基因強調一基因的作用補充另一基因所決定的基本表現。

**比較重點:**兩者皆涉及非等位基因的交互作用,且常出現 9:79:7 分離比;差別在於「共同必需」與「基本作用加上補充作用」的概念。

(二)Monoecious 與 Dioecious

**雌雄同株(monoecious)**是指同一植株上分別具有雄花與雌花,兩種花器分開,但位於同一個體上。玉米、黃瓜及南瓜是常見例子。

**雌雄異株(dioecious)**是指雄花與雌花分別著生於不同植株;一株只具有雄性功能,另一株只具有雌性功能。奇異果、木瓜及蘆筍可見此種性別配置。

**比較重點:**兩者都有雄花與雌花,差異在於是否位於同一植株。雌雄同株不等於兩性花;兩性花是在同一朵花中同時具有雄蕊與雌蕊。

(三)Penetrance 與 Expressivity

**外顯率(penetrance)**是具有特定基因型的個體中,實際表現出該性狀的個體比例。若 NN 個具相關基因型的個體中有 nn 個表現性狀,則:

外顯率=nN×100%\text{外顯率}=\frac{n}{N}\times 100\%

完全外顯表示所有具該基因型的個體皆表現性狀;不完全外顯表示只有部分個體表現。

**表現度(expressivity)**是性狀在已表現的個體中,表現強弱或程度的差異。例如,同一基因型的個體都出現花色斑紋,但斑紋面積或顏色深淺不同,屬表現度不同。

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第 二 題25 分

香菇蘭是近年來國內新興的香料作物,請分別說明利用扦插技術與組織培養技術進行其種苗繁殖時應需注意事項為何?(25 分)

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核心觀念

香菇蘭(又稱香莢蘭,Vanilla planifolia)是蘭科攀緣植物,生產上主要採用營養繁殖。扦插利用莖節的腋芽與節部生根能力繁殖;組織培養則以莖節、芽體等為培植體,在無菌條件下增殖,再誘導生根、馴化成苗。

本題重點是比較兩種繁殖方式的操作要點:扦插須兼顧插穗品質、節位、傷口癒合與水分管理;組織培養須掌握母株與培植體選擇、消毒、增殖、生根及馴化,並注意品種真實性與污染、變異問題。

解題方法

作答可依「材料選擇—繁殖操作—環境管理—苗木品質」的順序,分別交代扦插與組織培養。題目問的是「應需注意事項」,因此要寫出關鍵操作及其目的,不必將某一套培養基配方或生長調節劑濃度當作唯一標準。

一、扦插繁殖注意事項

  1. 選擇母株與插穗 選取生長健壯、無病蟲害、來源與品種清楚的母株,剪取成熟、充實的莖蔓作插穗。香菇蘭以莖節繁殖,插穗應保留數個節位及腋芽;避免使用過嫩、過老、受傷或帶病莖段。若採商業繁殖,母株的健康狀況與果莢生產性狀會影響後代苗品質。

  2. 處理切口與節位 剪切工具須清潔,插穗切口宜平整。剪下後可先置陰涼通風處,使切口稍為乾燥癒合,再行扦插,以降低切口感染及腐爛風險。扦插時使節部接觸介質或介質表面,保留腋芽供新梢萌發;不可深埋莖蔓,以免通氣不良而腐爛。

  3. 介質與水分管理 使用清潔、疏鬆、排水良好且保水適中的介質,保持介質濕潤但不積水。香菇蘭為攀緣蘭科植物,莖節可發根,扦插初期宜維持較高空氣濕度,並提供遮陰與通風,減少插穗失水;同時避免環境過悶、介質長期飽和而引起病害。

  4. 扦插後管理與出圃 初期避免強光直射及頻繁移動,待節部發根、新芽生長且植株穩定後,再逐步增加光照與通風。移植時保護新根,並提供攀附支架或適合攀爬的栽培環境。

  5. 效率與病害風險 扦插操作簡便、容易維持母株性狀,但繁殖倍率有限,且剪取莖蔓會消耗母株材料;若母株帶有病原,也可能隨插穗傳播。因此應保留健康母株並做好工具消毒及苗木檢查。

二、組織培養繁殖注意事項

  1. 母株與培植體選擇 選擇健康、性狀優良且來源明確的母株。可用莖節及其腋芽作培植體,以腋芽增殖較能維持品種性狀;若利用癒傷組織或原球莖等途徑大量再生,繁殖速度雖快,但較須留意體細胞變異。培植體應取幼嫩、活力佳且無可見病斑的部位。
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第 三 題20 分

請詳細說明如何以正向遺傳學(Forward Genetics)的策略,進行甜椒抗青枯病品種之改良。(20 分)

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核心觀念

正向遺傳學(forward genetics)是從「可觀察的性狀差異」出發,先找出具有目標性狀的材料,再透過雜交族群、遺傳分析與分子標誌定位,找出控制性狀的遺傳區域,最後將有利等位基因導入栽培品種。這與反向遺傳學由已知基因出發、再觀察其功能的研究方向相反。

本題的目標性狀是甜椒(Capsicum annuum)對青枯病的抗性。青枯病由青枯病菌(Ralstonia solanacearum species complex)引起,抗性不能只憑單株外觀判定;須先建立可靠的接種與病害評估方法,再分析抗性是否可遺傳及其遺傳方式。甜椒青枯病抗性可能由少數基因或多基因控制,且不同抗源、菌株及環境下遺傳表現可能不同,因此不應預設為單一抗病基因。

解題方法:以表現型為起點,逐步找到並利用抗性

  1. 蒐集與篩選種原

蒐集甜椒品種、育種系及相關種原,在一致條件下接種具代表性的青枯病菌菌株。設置感病對照、已知抗病對照及未接種對照,確認接種有效並排除環境或栽培差異造成的假抗性。病害評估可記錄發病率、萎凋程度、存活率及病程進展,並依重複試驗結果選出穩定抗病材料作為抗源。

青枯病菌族群具有差異,應選用與目標栽培區相關的菌株;若育種目標是較廣泛的抗性,則須以多個代表性菌株檢定,避免只對單一菌株有效。

  1. 確認抗性可遺傳,並分析遺傳方式

選取抗病親本(R)與感病、但園藝性狀優良的親本(S)雜交,取得 F1F_1,再自交產生 F2F_2;必要時另作回交世代。各世代須在相同接種條件下鑑定,以比較親本、F1F_1、F2F_2及回交族群的抗病表現。

若抗病與感病可明確分級,可用孟德爾分離比及卡方檢定檢驗單基因假說;若病害指數呈連續分布,則視為數量性狀,進一步估計遺傳力、分離變異及各基因座的效應。這一步的目的,是確認抗性來源及其遺傳模式,並決定後續採用單株選拔、家系選拔或分子標誌輔助選拔。

  1. 建立分離族群並定位抗性基因或 QTL

對親本及分離族群進行基因型分析,使用分子標誌建立連鎖圖譜,將標誌基因型與接種後的抗病表現相互比對。若抗性由主要基因控制,可尋找與抗性緊密連鎖的標誌;

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第 四 題25 分

請解釋基因編輯(Gene editing)技術之意義,並比較不同編輯技術之異同。(25 分)

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核心觀念

基因編輯是利用可設計的核酸辨識系統,將特定基因組位置作為標的,進行定點 DNA 序列改變的技術。它可造成基因插入、缺失、替換或功能調整;與傳統誘變育種相比,基因編輯的改變位置較具目標性,也較容易針對已知基因功能設計。

基因編輯工具主要由兩部分構成:辨識標的序列的元件,以及執行切割或化學改變的效應元件。若工具造成 DNA 雙股斷裂,細胞會以自身修復機制處理:

  • 非同源末端接合(NHEJ):直接接合斷裂端,常造成少數鹼基的插入或缺失(indel),可使基因失去功能。
  • 同源重組修復(HDR):利用提供的同源 DNA 模板進行修復,可導入指定序列,但在植物細胞中的效率通常較受限制。

依改變方式,也可概分為:以 DNA 雙股斷裂後修復為主的第一代核酸酶編輯、直接改變單一鹼基的鹼基編輯,以及可依模板改寫 DNA 序列的先導編輯。

解題方法

本題為比較題,可依「標的辨識方式、效應機制、可造成的改變、優缺點與育種應用」逐項整理。先說明基因編輯的共同原理,再比較各工具,最後補充其在園藝作物育種上的意義與限制。

不同編輯技術之比較

技術標的辨識方式與效應機制主要可造成的改變特性與限制
大範圍核酸酶(meganuclease)酵素本身辨識較長的 DNA 序列並切割切割後經 NHEJ 形成 indel,或藉 HDR 導入指定序列標的辨識高度依賴酵素本身,設計及改造較不容易;可辨識較長序列,具一定專一性
鋅指核酸酶(ZFN)鋅指蛋白辨識標的 DNA;FokI 核酸酶切割區需成對結合後才切割產生雙股斷裂,再由 NHEJ 或 HDR 修復標的設計需逐一組合蛋白辨識模組,製作較繁複;有脫靶切割風險
類轉錄活化因子效應子核酸酶(TALEN)TAL effector 蛋白辨識 DNA;FokI 成對結合後切割產生雙股斷裂,再由 NHEJ 或 HDR 修復DNA 辨識模組較容易依序列設計,標的範圍較彈性;蛋白較大,載體建構與送入植物細胞較不便
CRISPR/Cas 系統導引 RNA(guide RNA)與目標 DNA 配對,引導 Cas 蛋白至標的;常見 Cas9 需符合 PAM 序列條件Cas9 切割後由 NHEJ 形成 indel,或由 HDR 進行模板導向修復更換導引 RNA 即可改變標的,設計與多位點編輯相對方便;仍須考量 PAM 限制及導引 RNA 與相似序列造成的脫靶
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