107 高普考高考三級 生藥中藥基原鑑定 中藥組織切片實地操作及鑑定 考古題詳解
第 一 題40 分
請利用外觀辨識下列藥材(A、B、C、D、E、F、G、H),寫出藥材正確名稱(並標示出正品或混淆品)及學名。
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核心觀念
本題評量考生對於法定中藥材及其常見混淆品、偽品之外觀性狀鑑別(Macroscopic Identification)與植物分類學基原學名(Scientific Name)之掌握程度。
- 法源與基原標準:依據命題當年(民國 107 年)適用之《臺灣中藥典》(第二版)規範,中藥材之正品必須符合法定收載之科名、學名(屬名、種小名、命名者)及指定藥用部位。(提醒:現行法已修正實施《臺灣中藥典》第四版)。
- 性狀鑑別依據:利用藥材的外形、大小、顏色、表面特徵(如皮孔、縱皺紋、鬚根痕)、質地、折斷面(如菊花心、車輪紋、雲錦花紋、導管排列方式)以及氣、味等特徵,精確區分正品與混淆品。
- 安全與法規界線:辨識中藥材混淆品時,特別重視是否摻雜具腎毒性之馬兜鈴酸(Aristolochic acid)藥材(如關木通、廣防己),此類藥材在臺灣已被主管機關公告禁用,臨床鑑別具有高度法規與用藥安全意義。
解題方法
本題為公職國家考試生藥中藥基原鑑定類科之現場實體操作試題,試卷原題僅提供代號並陳列實體檢體供考生逐一輪替檢視。本題題目資訊未隨卷附上實物照片,依據國家考試生藥基原鑑定類科實地測驗之歷年命題慣例與高頻配對,以最經典之四組「正品與混淆品/偽品」(共八項檢體 A~H)作為標準設定解答。
外觀鑑別解題切入點採用「外觀特徵三步鑑別法」:
- 外表觀察:檢視外皮顏色、栓皮剝落程度、皮孔型態、有無環紋或鬚根凹痕。
- 斷面組織觀察:觀察皮部與木部比例、形成層環紋、維管束排列(放射狀、車輪狀、同心環狀或異型維管束)。
- 質地與氣味鑑定:辨別折斷時的粉性、纖維性、質地堅硬度,以及聞氣、嘗味之特殊風味。
檢體分析(檢體 A~H 逐項解析)
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檢體 A:黃耆(正品)
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正品/混淆品:正品
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基原學名:Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge 或 Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge var. mongholicus (Bunge) P.K.Hsiao(豆科 Fabaceae,乾燥根)
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外觀關鍵特徵:呈圓柱形,少分枝,上端較粗。表面灰黃色或淡棕褐色,有整齊縱皺紋及橫向皮孔。質硬而韌,斷面纖維性強並顯粉性;皮部黃白色,木部淡黃色,具有明顯放射狀紋理及裂隙,俗稱「菊花心」;形成層環呈棕色,呈現內外分明的「金井玉欄」。氣微,味微甜,嚼之具豆腥氣。
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檢體 B:紅耆(混淆品/代用品)
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正品/混淆品:混淆品
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基原學名:Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.(豆科 Fabaceae,乾燥根)
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外觀關鍵特徵:呈圓柱形,少分枝。外表皮紅棕色至灰紅棕色,栓皮易脫落並露出淡黃色皮部,具顯著的橫向長皮孔及縱皺紋。質堅硬,折斷面纖維性較黃耆弱,富粉性;斷面木質部顏色較深,無裂隙,不具黃耆特有之「菊花心」,形成層環明顯呈金黃色或棕色。味甜,無顯著豆腥氣。
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檢體 C:川木通(正品)
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正品/混淆品:正品
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基原學名:Clematis armandii Franch. 或 Clematis montana Buch.-Ham. ex DC.(毛茛科 Ranunculaceae,乾燥藤莖)
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外觀關鍵特徵:呈長圓柱形,略扭曲,表面黃棕色至灰褐色,具縱向細棱線,節部膨大。體輕質硬,斷面邊緣不整齊,皮部較薄,木部黃白色,可見導管細孔呈多層放射狀排列,射線清晰,髓部小或有時呈空洞。味淡或微苦。
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檢體 D:關木通(混淆品/禁用偽品)
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正品/混淆品:混淆品
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基原學名:Aristolochia manshuriensis Kom.(馬兜鈴科 Aristolochiaceae,乾燥藤莖)
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外觀關鍵特徵:呈長圓柱形,粗細均勻,表面灰黃色或黃褐色,具淺縱溝與裂紋,節部不膨大。體輕質堅,不易折斷;斷面皮部甚薄,木部寬廣黃色,導管孔洞大且排列緻密,呈同心環狀排列如篩孔(蜂窩狀),髓部不明顯。氣微,味極苦。本品含有馬兜鈴酸,具嚴重腎毒性,臺灣已全面公告禁用。
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檢體 E:粉防己(正品)
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正品/混淆品:正品
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基原學名:Stephania tetrandra S.Moore(防己科 Menispermaceae,乾
第 二 題30 分
請利用徒手切片作出市售藥材切片標本,並選擇適當染劑染色後,鏡檢組織圖特徵,同時區分 I、J 兩種藥材,標示主要特徵之組織位置,並依比例規格繪出藥材鏡檢組織圖及寫出藥材正確名稱。
(每件完成之作品置於標本架上,連同試卷一併繳回。)
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一、核心觀念
本題為高考三級公職藥師/生藥中藥基原鑑定類科之核心實作考題,主要評量考生是否具備以下三項核心能力與法規知識:
- 中藥組織形態學與生藥鑑定學原理:依據《臺灣中藥典》各藥材項下之「組織切片顯微鑑別」規格,掌握植物根、根莖類藥材之初生與次生構造特徵(周皮、皮層、分泌組織、韌皮部、形成層、木質部及髓部),並準確辨識細胞內含物(草酸鈣結晶型態、澱粉粒等)與特化組織(如晶鞘纖維、石細胞群、油室等)。
- 生藥顯微化學呈色反應:利用特定組織化學染劑(如間苯三酚-鹽酸試劑反應木質素、蘇丹III反應木栓質或脂質、碘化鉀試劑反應澱粉),使特徵組織具備光學對比,以利顯微鏡鑑別。
- 法規依據:以命題當年(民國 107 年)之法源《臺灣中藥典》第二版之鑑別通則與個別品目規範為準(現行法規已修訂至《臺灣中藥典》第四版)。
二、解題方法(標準實驗操作與繪圖步驟)
步驟一:藥材軟化與徒手切片操作(Free-hand Sectioning)
- 軟化處理:取乾燥根類藥材 I、J,置於潤濕濾紙或溫水中軟化約 分鐘,使組織富含水分且質地韌化(過硬易崩刃、過軟易擠壓變形)。
- 支撐與夾持:將藥材截取約 小段。若藥材較細,可藉由胡蘿蔔塊或馬鈴薯塊作為支持物自中間剖開夾持。
- 切片手法:
- 使用全新雙面刮鬍刀片,刀刃以水潤濕以減少摩擦阻力。
- 左手拇指與食指平握樣品,使切面高出手指約 ;右手持刀,將刀面平貼於左手食指第一指節,由外向內、呈 滑切拉刀(切忌垂直下壓剁切)。
- 切片厚度應控制在單層至雙層細胞厚度(約 ),以薄且透明、無捲曲裂隙者為佳。
- 展片:以沾水之小毛筆挑取切片,輕移入盛有蒸餾水之表面皿中展開備用。
步驟二:化學染色與封片(Histochemical Staining)
本題主要鑑別根類之木質化厚壁組織(導管、纖維、石細胞)與澱粉粒,選用以下試劑:
- 間苯三酚-鹽酸試劑(Phloroglucinol-HCl,Wiesner 試劑):
- 配製與操作:滴加 間苯三酚乙醇溶液於載玻片切片上,靜置約 分鐘滲透,吸去多餘液體後,滴加濃鹽酸(約 ) 滴,立即蓋上蓋玻片。
- 反應機制:間苯三酚在強酸環境下與木質素(Lignin)中之松柏醛基(Coniferyl aldehyde groups)縮合,生成櫻桃紅至紫紅色化合物。木質化之導管壁、木纖維及石細胞壁均呈現鮮紅色。
- 稀碘液(Lugol's Solution):
- 另取一切片,滴加碘化鉀試液,觀察薄壁細胞內之澱粉粒呈藍黑色反應,以確認薄壁組織分布範圍。
步驟三:顯微鏡檢與組織圖繪製規格
- 低倍鏡檢():觀察整體橫切面輪廓、皮部與木部之比例、形成層形狀及射線排列方式。
- 高倍鏡檢():針對「石細胞有無」、「晶鞘纖維形態」及「射線裂隙」進行細部確認。
- 規範繪圖:
- 組織簡圖(Schematic Diagram):繪製橫切面之 1/4 或 1/2 扇形輪廓,嚴格依實測比例標註外層至內層構造:周皮(木栓層) 栓內層/皮層 韌皮部(標出裂隙與射線) 形成層環 木質部(標出導管與木纖維分布)。
- 特徵細胞組織圖(Detailed Cellular Diagram):於旁側精細放大繪出關鍵診斷特徵(如晶鞘纖維、石細胞群、具緣紋孔導管),並加註比例尺(Scale bar)。
- 標示指引線:引線必須相互平行、不可交叉,右側以工整正楷標明中文組織學專有名詞。
三、鑑別項目與組織特徵對照分析
本題試卷因屬現場實體操作考科,卷面未直接明印藥材代號之名稱(現場以托盤編號 I、J 提供實物)。依考選部國考命題慣例與當年度術科實測設定,此題為最經典之易混淆中藥根類切片鑑別組合:藥材 I 為黃耆,藥材 J 為紅耆。兩者橫切面之顯微組織構造逐項對照分析如下:
第 三 題10 分
請利用徒手切片作出 K 藥材切片標本,並選擇適當染劑染色後,依比例規格繪出藥材鏡檢組織圖,並標示主要特徵之組織位置及寫出藥材正確名稱。
(每件完成之作品置於標本架上,連同試卷一併繳回。)
登入後即可作答並保存紀錄。
核心觀念
本題為公職人員高等考試三級考試(生藥中藥基原鑑定類科)實地操作核心試題,檢驗考生於顯微鏡下進行中藥組織切片製作、化學呈色鑑別、組織微觀構造辨識及規範化顯微組織繪圖之專業實務能力。
- 法規依據:藥材顯微特徵與鑑別規格以命題當年(民國 107 年)公告實施之《臺灣中藥典》(第二版)為準(現行法已修正發布《臺灣中藥典》第四版)。
- 徒手切片原理:利用切片刀刃之單向滑動剪切力,配合支撐載體(如新鮮胡蘿蔔塊),徒手切出厚度約 (單層細胞透光厚度)之組織橫切片(Transverse Section, T.S.)。
- 組織化學染色原理(木質化反應):間苯三酚-濃鹽酸反應(Phloroglucinol-HCl reaction)。間苯三酚試液在強酸(濃鹽酸)存在下,與植物細胞壁木質素(Lignin)中之松柏醛(Coniferyl aldehyde)基團發生親電縮合,生成櫻桃紅至紫紅色化合物,藉此精準標定木質化之導管、木纖維、木質部射線與厚壁組織。
- 顯微組織繪圖規格:分為「組織構造簡圖(Low power, 約 )」與「特徵細部圖(High power, 約 )」,需維持精確組織比例,線條須為封閉且平滑之單一墨線/硬鉛線,不得塗抹陰影,標籤引線平行直出且不可交叉。
解題方法
本題為考場實物操作試題,題幹未直接附上考場實物編號 K 之巨觀外觀或顯微視野數據,依公職生藥基原鑑定國家考試命題慣例與最常考之根類代表性中藥標本,以【甘草】(Glycyrrhizae Radix et Rhizoma)為定案基準進行完整標準化實作解題。
一、 實地操作步驟(SOP)
- 標本軟化與包埋:
- 檢視 K 藥材,若組織過於乾脆,先置於甘油-水(1:1)溶液中微浸潤軟化。
- 選取質地均勻之胡蘿蔔根塊,中央縱切一隙縫,將藥材固定夾持於其中作為支持物。
- 徒手橫切片製作:
- 左手持夾有藥材之胡蘿蔔塊,右手持雙面剃刀(表面以水潤濕以減低表面張力)。
- 刀刃平貼載體上表面,以水平拉刀滑動方式自外向內連續切削,刀刃不可垂直剁壓。
- 將切下之薄片立即移入盛有蒸餾水之培養皿中,挑選展開良好、邊緣均勻且半透明之單層細胞橫切片。
- 染色與製片:
- 挑取切片置於乾淨載玻片中央,滴加 間苯三酚乙醇溶液 1 滴,浸潤反應約 1 分鐘。
- 滴加濃鹽酸 1 滴,立即以鑷子引導蓋玻片以 角緩慢蓋上,避免產生氣泡。
- 蓋玻片四周溢出之酸液以吸水紙徹底吸乾,置於顯微鏡載物台鏡檢。
- 顯微鏡檢與特徵確認(甘草橫切面特徵):
- 木栓層:最外層為數列至數十列紅棕色扁平木栓細胞。
- 皮層:狹窄,由薄壁細胞組成。
- 韌皮部:佔相當比例,射線向外漸次彎曲展開(略呈波狀或喇叭狀);近形成層處可見篩管群;薄壁組織間散布成束之韌皮纖維,纖維束周圍薄壁細胞內各含有草酸鈣方晶,構成「晶鞘纖維」。
- 形成層:呈明顯之連續扁平細胞環。
- 木質部:佔橫切面大部分。導管直徑粗大(常單個或 個成群);木纖維束發達,染成鮮豔櫻桃紅色,纖維束周邊同樣伴隨有草酸鈣方晶形成之「晶鞘纖維」;木射線寬約 列薄壁細胞。
- 髓部:若切片取自根莖(Rhizome),中央具有發達髓部,含澱粉粒與少數草酸鈣方晶;若切片取自直根(Radix),則中央為初生木質部而無髓部。
二、 藥材鏡檢組織圖繪製規格
依考試卷要求之比例規格,於作圖區繪出兩部分:
- 橫切面組織構造簡圖(比例規格約 ):
- 繪出完整圓形或橢圓形橫切面輪廓線。
- 由外至內繪製層次分界:
- 最外層雙實線:標示【木栓層】
- 次外層狹窄帶:標示【皮層】
- 寬廣韌皮部帶:以放射狀虛線標示【韌皮射線】,點狀集合區標示【韌皮纖維束及篩管群】
- 單一清晰同心圓環:標示【形成層】
- 中央寬廣區域:以圓圈標示粗大之【導管】,網狀分布區標示【木纖維束】,放射狀通道標示【木射線】
- 正中央封閉區域(若為根莖):標示【髓部】
- 主要診斷特徵詳細圖(高倍放大約 ):
第 四 題20 分
請利用徒手切片作出 L 藥材切片標本,並選擇適當染劑染色後,依比例規格繪出藥材鏡檢組織圖,並標示藥材名稱及主要特徵之組織位置,及寫出藥材正確名稱。
(每件完成之作品置於標本架上,連同試卷一併繳回。)
登入後即可作答並保存紀錄。
核心觀念
本題評量生藥學之核心技術「徒手切片法(Freehand Sectioning)」、「組織化學染色(Histochemical Staining)」及「顯微鏡檢繪圖與生藥組織鑑別」。依據命題當年(民國 107 年)適用之《中華中藥典》規範,組織切片鑑定的核心要點如下:
- 徒手切片操作規範:
- 檢體需經適當軟化處理,藉由支持物(如胡蘿蔔、保麗龍或接骨木髓)固定夾持。
- 運刀要求切面平整、厚度均勻,達到「單層細胞厚度(透光佳)」的標準,切忌推擠撕裂細胞壁。
- 組織化學染色原理:
- 間苯三酚-鹽酸試液(Phloroglucinol-HCl test solution):用於檢驗「木質化(Lignified)」細胞壁(如導管、木纖維、石細胞)。間苯三酚在濃鹽酸酸性條件下,與木質素的松柏醛(Coniferyl aldehyde)基團結合,產生櫻桃紅至洋紅色(Cherry red / Magenta)複合物。
- 水合氯醛試液(Chloral hydrate test solution):為優良透化劑(Clearing agent),能溶解澱粉粒、樹脂及色素,促使草酸鈣結晶(方晶、簇晶、針晶)等內涵物清晰顯現。
- 稀碘液(Dilute Iodine TS / Lugol's solution):檢驗澱粉粒,呈藍色至藍紫色。
- 顯微組織圖繪製規格:
- 包含「低倍組織全貌圖」(Tissue plan / Schema,放大倍率約 ,展現各組織層次之比例與維管束排列走勢)與「高倍特徵細部圖」(Detailed cellular view,放大倍率約 ,展現關鍵鑑別細胞結構)。
- 繪圖採細黑線條(不打陰影、不塗黑),細胞壁必須以雙線繪製;引線須以尺畫出水平平行線,不可交叉,名稱統一對齊於圖旁。
解題方法
本題題幹僅載明代號「L 藥材」而缺乏實體檢體與顯微圖像資訊,依歷年國家考試命題規範與出題頻率,設定該檢體為最經典之必考根部生藥「甘草」(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)進行標準示範解答。
步驟一:徒手切片實地操作
- 材料預處理:取乾燥甘草根,置於潮濕箱或溫水中軟化約 15 至 30 分鐘,至軟硬適中(以指甲可微壓入但組織不腐爛為度)。
- 夾持與運刀:
- 將軟化之甘草修切成約 之小段,垂直夾入刻有凹槽的鮮胡蘿蔔支持塊中。
- 左手拇指與食指握緊支持物與樣品,頂端露出樣品切面約 ;右手持雙面剃刀(預先以蒸餾水濕潤刀面)。
- 刀刃平放於切面上,刀口向內,以「拉切法(Draw-cut)」平穩、連續、迅速滑動刀片,連續切削薄片 20~30 片。
- 浮載與挑選:
- 隨切隨將刀片浸入盛有清水之培養皿中,輕輕晃動使切片漂浮脫落。
- 以毛筆尖或解剖針挑選邊緣最薄、呈完全透光狀之完整橫切片備用。
步驟二:化學染色與製片
- 染色與封片:
- 挑取優質切片置於乾淨載玻片中央,滴加間苯三酚試液 1~2 滴,靜置浸潤 1~2 分鐘。
- 滴加濃鹽酸 1 滴,組織中之木質化結構立刻顯現鮮艷紅色。
- 傾斜 緩緩蓋上蓋玻片,避免氣泡產生;若有多餘染液,以濾紙條自蓋玻片邊緣小心吸除,另自對側邊緣滴加 50% 甘油水溶液作為封片劑,防止乾枯。
步驟三:鏡檢觀察與組織定位
置於光學顯微鏡下,先以低倍鏡()對焦,觀察組織層次分布;再轉至高倍鏡()檢視維管束邊緣之特殊細胞(特別是纖維周圍的結晶分布)。
步驟四:依比例規格繪製鏡檢組織圖
- 低倍全貌圖(橫切面比例圖,標定尺度):
- 繪出同心圓層次,由外而內依序為:木栓層 皮層 韌皮部(含放射狀裂隙與射線) 形成層環 木質部(含發達導管與木射線) 中央無髓(若為根部)或具髓(若為根莖)。
- 高倍特徵細部圖:
- 繪出「晶鞘纖維(Crystal fiber sheath)」:木質化厚壁纖維束周圍,由薄壁細胞包圍,每一薄壁細胞內各含有一枚草酸鈣方晶(Prismatic crystal of calcium oxalate)。
- 繪出具緣紋孔(Bordered pitted)或網紋大型導管,細胞壁呈雙線,顯示明顯木質化增厚。
選項分析
本實作題須依鏡檢特徵逐層精準判定構造。針對甘草切片由外至內之主要特徵組織位置與鑑別依據剖析如下: