109 食品技師高等考試 食品技師 食品微生物學(第一次) 考古題詳解
第 一 題20 分
請說明細菌及黴菌的產孢過程(sporulation)及孢子的存在對食品的影響。並列舉一種產孢細菌的菌種(學名)及黴菌各類孢子的名稱加以說明。
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核心觀念
本題考細菌與黴菌的產孢方式、孢子的生物學功能,以及孢子對食品安全與品質的影響。兩類微生物的孢子性質不同:
- 細菌芽孢(endospore)是部分細菌在環境不利時形成的休眠構造,耐熱、耐乾燥及耐多種不良環境;環境適宜時可萌發成營養細胞。芽孢主要用於存活,不是繁殖。
- 黴菌孢子是黴菌繁殖與傳播的重要構造,可由無性或有性方式形成;通常比細菌芽孢更容易受熱破壞,但可隨空氣、器具或原料散播,造成食品污染、腐敗或產生黴菌毒素。
解題方法
依「形成目的與過程 → 孢子種類 → 對食品的影響」分段作答。先區分細菌芽孢是抗逆性的休眠構造、黴菌孢子以繁殖及散播為主,再列舉代表菌種與黴菌孢子類型,即可完整涵蓋題目要求。
產孢過程與孢子種類
一、細菌芽孢的形成
以芽孢桿菌屬及梭狀芽孢桿菌屬的部分細菌為例,當營養不足、乾燥或其他環境條件不利時,營養細胞會啟動芽孢形成。典型過程如下:
- DNA 複製與軸絲形成:染色體複製後排列於細胞內。
- 不對稱分裂:形成較小的前芽孢(forespore)及較大的母細胞。
- 母細胞包覆前芽孢:前芽孢被母細胞膜包覆,形成雙層膜。
- 皮層與芽孢外殼形成:形成皮層(cortex)及多層蛋白質外殼(spore coat);部分菌種另有外被(exosporium)。
- 成熟與釋放:芽孢脫水、累積鈣離子與二吡啶羧酸(dipicolinic acid),耐受性增強;母細胞裂解後釋出成熟芽孢。
- 萌發與出芽:環境適宜時,芽孢吸水並萌發,恢復為可生長、代謝的營養細胞。
細菌芽孢的形成通常是每個營養細胞形成一個芽孢,因此屬於個體存活機制,不會增加細菌個體數目。
產孢細菌例: Bacillus cereus(仙人掌桿菌)。此菌可形成芽孢,與食品腐敗及食品中毒相關。
二、黴菌孢子的形成
黴菌菌絲生長後,可形成產孢構造,依無性或有性方式產生孢子。孢子成熟後散播,在適宜基質與環境中萌發形成菌絲。
- 無性孢子
- 分生孢子(conidium):由分生孢子梗外生形成,成熟後散播;常見於 Aspergillus、Penicillium。
第 二 題20 分
請說明新鮮牛乳中常見既有的抗菌物質及可能發生不同類型的腐敗與主要作用菌種。
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核心觀念
本題考查新鮮牛乳的天然抑菌系統,以及常見乳品腐敗型態與其主要作用菌。新鮮牛乳含有若干天然抗菌成分,可在擠乳後短時間內抑制部分微生物生長;但這種抑制作用有限,不能取代衛生操作與低溫冷藏。腐敗型態則依微生物代謝底物與產物判斷,常見者包括產酸凝乳、甜凝乳、產氣、脂解、蛋白質分解、黏液化及變色。
解題方法
先列出牛乳中重要的天然抗菌物質,再按「主要變化—作用菌種—腐敗特徵」整理腐敗類型。作答時應把一般乳酸發酵造成的酸凝乳,與蛋白酶造成的甜凝乳區分;也要說明冷藏乳中嗜冷菌及其耐熱酵素造成的品質劣變。
新鮮牛乳中的天然抗菌物質
- 乳過氧化酶系統(lactoperoxidase system, LP system):乳過氧化酶利用過氧化氫氧化硫氰酸根,生成具抑菌作用的氧化產物;可抑制多種細菌,對部分革蘭氏陰性菌及乳酸菌有抑制作用。
- 乳鐵蛋白(lactoferrin):結合鐵離子,降低微生物可利用的鐵,抑制其生長;對部分需鐵微生物較具抑制效果。
- 溶菌酶(lysozyme):水解細菌細胞壁肽聚醣,造成細胞壁受損;一般對革蘭氏陽性菌的作用較明顯。
- 免疫球蛋白(immunoglobulins)及其他防禦因子:可透過抗體作用及其他非特異性防禦機制,降低部分微生物的存活或附著。
這些成分的含量與活性有限,牛乳一旦受污染且保存條件適合,微生物仍會增殖並造成腐敗。
常見腐敗型態與主要作用菌
| 腐敗型態 | 主要變化與特徵 | 主要作用菌或菌群 |
|---|---|---|
| 酸敗、酸凝乳(souring) | 乳糖被發酵產生乳酸,酸度上升、酪蛋白凝集 | 乳酸菌,如 Lactococcus、Lactobacillus、Streptococcus |
| 甜凝乳(sweet curdling) | 凝乳但酸味不明顯,常由凝乳酶或蛋白酶作用引起 | Bacillus、Proteus 等產蛋白酶菌;部分 Micrococcus 亦可參與 |
第 三 題20 分
請分別就食品的 、 及溫度等影響因子,說明一般細菌及黴菌的適當生長範圍及個別因子對生長的影響。並說明在特定食品中調控此三種因子的相互作用對微生物生長的影響狀況。
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核心觀念
本題考查食品保存的三項重要因子:酸鹼度()、水活性()及溫度。它們會影響微生物的酵素活性、細胞膜功能及水分利用,進而改變生長速度或使生長停止。食品保存常將這些因子合併調控,形成「柵欄效應」:每項因子各自抑制微生物,合併後能進一步延緩或阻止生長。
水活性是食品中可供微生物利用的水分指標,定義為食品平衡蒸氣壓與相同溫度下純水蒸氣壓的比值:
介於 0 與 1 之間; 越低,可供微生物利用的水分通常越少。以下數值為一般性概略範圍,實際界限會依微生物種類、食品成分及其他環境因子而變動。
解題方法
依序比較一般細菌與黴菌在三項因子的適生範圍,再以一種食品說明如何合併調控。作答時須指出「適生範圍不是絕對界線」:微生物種類差異很大,且某一因子不利時,其他條件會影響其生長能力。
各因子對生長的影響
一、
會影響細胞內酵素反應、營養物質運輸及細胞膜功能。偏離微生物的適宜範圍,生長速度通常下降;酸度過高時,多數微生物會停止生長或死亡。
| 微生物類別 | 概略生長範圍 | 常見最適範圍 | 說明 |
|---|---|---|---|
| 一般細菌 | 約 4.5–9 | 約 6.5–7.5 | 多數偏好近中性環境;乳酸菌等耐酸菌可在較低 生長。 |
| 黴菌 | 約 1.5–9 | 約 4–6 | 通常比一般細菌耐酸,因此酸性食品仍可能發生黴菌腐敗。 |
低 能抑制許多細菌,但不代表食品無菌,也不能單靠酸度推定所有病原菌都無法存活。食品中的有機酸種類、濃度及微生物耐酸性也會影響抑制效果。
二、
降低 會減少微生物可利用的水分,使營養運輸與代謝受到限制。添加食鹽、糖,或乾燥食品,都可降低 。
| 微生物類別 | 概略最低生長 | 說明 |
|---|---|---|
| 一般細菌 | 多數約 以上 | 相較於黴菌,細菌通常需要較高 ;部分耐鹽菌或耐滲透壓菌可在較低值生長。 |
| 黴菌 | 多數約 以上 | 黴菌通常比一般細菌耐乾燥;嗜乾黴菌在更低 仍可能生長,部分可低至約 。 |
因此,降低 往往能有效抑制多數細菌,但未必能完全防止黴菌。高糖、高鹽食品若仍有足夠可利用水分,仍須留意耐低水活性微生物。
三、溫度
第 四 題20 分
請說明下列微生物可存在食品的主要類別、存在意義及可能對人體造成不良的影響。(每小題 5 分,共 20 分)
(一) Aspergillus parasiticus
(二) Penicillium expansum
(三) Campylobacter jejuni
(四) Enterobacteriaceae
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核心觀念
本題考查食品微生物的「食品來源與分布、食品衛生或品質意義,以及對人體的危害」。作答時應把每種微生物連結到代表性食品、主要危害因子或指標意義,並避免把整個菌群一概視為致病菌。
解題方法
依序回答三件事:常見於哪些食品或原料、存在代表何種食品衛生或品質問題、攝食後可能造成什麼不良影響。黴菌題須指出其產生的黴菌毒素及毒性;細菌題則說明主要污染來源、可能致病性或衛生指標意義。
各小題詳解
(一)Aspergillus parasiticus
主要存在食品類別: 常見於受污染或儲藏不當的穀類、玉米、花生及其他油料種子、堅果等農產品。高溫、潮濕及儲藏管理不良,有利於其生長與產毒。
存在意義: 此菌是重要的產黃麴毒素黴菌,可產生黃麴毒素 B₁、B₂、G₁、G₂;食品中檢出該菌,表示原料或儲藏環境可能有黴菌污染及黃麴毒素風險。黃麴毒素 B₁ 是重要的食品污染毒素之一。
對人體的不良影響: 大量攝入可造成急性肝毒性,嚴重時引起急性黃麴毒素中毒;長期或反覆暴露則增加肝癌風險,尤其在同時感染 B 型肝炎病毒等情形下,肝癌風險更值得注意。
(二)Penicillium expansum
主要存在食品類別: 常見於蘋果、梨等仁果類水果,尤其容易侵入受傷、碰撞或腐敗的果實;也可出現在果汁、蘋果酒及其他以受污染水果製成的產品中。
存在意義: 此菌會造成水果採後的藍黴腐敗,並可產生棒麴毒素(patulin)。因此,它既是水果腐敗菌,也是果汁及水果加工品的黴菌毒素風險來源。只移除果實表面的可見黴斑,不能據此判定內部或加工原料不含棒麴毒素。
對人體的不良影響: 棒麴毒素可造成胃腸道不適,並具有細胞毒性;持續或較高暴露亦有肝、腎及免疫系統危害的疑慮。食用來源若含受污染果實製成的產品,便可能攝入此毒素。
(三)Campylobacter jejuni
主要存在食品類別: 主要與禽類腸道及禽肉污染有關,常見風險食品包括生或未熟透的雞肉、其他禽肉,以及受污染的未殺菌乳品和飲水。生肉汁液交叉污染即食食品,也會造成傳播。
第 五 題20 分
以太空包培養食用菇類產製子實體(fruiting body)時,請說明培養基組成分(包括使用木屑為主原料的前處理、其他組成分及各組成分對菇類生長的影響)、如何設定太空包內培養基的物理因子及培養期間環境條件的管理。
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核心觀念
本題考查以太空包栽培食用菇類時,如何把木質原料調製成適合菌絲生長、並能誘導子實體形成的培養基,以及培養期間對水分、通氣、溫度、光線與濕度的管理。太空包是將培養基裝入耐熱塑膠袋後滅菌、接種,再於袋內培養菌絲的栽培單位。
栽培條件須依菇種與菌株調整;木屑配方與培養參數不是所有菇類共用的固定值。作答時應說明各因子調控的目的,並以常見木屑型食用菇類的原則作答。
解題方法
依「原料前處理與配方 → 培養基物理性質 → 滅菌接種與菌絲培養 → 搔菌或開袋出菇管理」的生產流程作答。各階段的目標不同:菌絲培養重視適當營養、含水與氣體交換;出菇階段則須配合菇種調整溫度、濕度、光線及通風,以誘導原基形成與子實體發育。
培養基組成與各成分的作用
木屑前處理
木屑是主要碳源與結構材料,常用闊葉樹木屑;應選乾燥、未腐敗、無油漆或防腐藥劑污染者。木屑先過篩去除過粗木片與異物,依需要調整粒徑,使培養基兼具孔隙與保水能力。過粗會使菌絲接觸不足、保水不均;過細則容易壓實,造成通氣不良。
木屑可先堆置或潤濕,使含水分布均勻,也可經堆積發酵或熟化,促使部分可溶性物質淋洗、降低生木屑中抑制菌絲生長的成分。前處理後再與其他原料混拌、調水、裝袋及滅菌。各菇種對木屑樹種與熟化程度的耐受性不同,配方須以栽培菇種為準。
其他組成分
- 米糠或麥麩:提供氮源、維生素與礦物質,補充木屑營養不足,促進菌絲生長;添加過多會提高培養基易利用養分,增加雜菌污染與發熱風險。
- 玉米粉、豆粉等穀類或植物性補充料:補充碳、氮及生長所需營養,須控制比例並充分混合,以免局部濃度過高或造成污染風險。
- 碳酸鈣或石灰質材料:調整酸鹼度並提供鈣質;用量過多會使酸鹼度偏離菇菌適生範圍。
- 石膏(硫酸鈣):補充鈣、硫並改善培養基結構、減少結團;本身不是主要碳源。
- 水:供菌絲代謝及養分溶解、運輸,並維持培養基含水量;水質宜潔淨,避免污染物或過高鹽分影響菌絲。
- 其他添加物:依菇種與栽培配方使用,不可只追求高營養,仍須兼顧孔隙、含水及滅菌效果。
太空包內培養基的物理因子設定
含水量
木屑型培養基常以含水率約 60–65% 作為調製參考,實際值依木屑粒徑、補充料比例與菇種調整。含水不足會使菌絲生長慢、培養基乾縮;含水過高則孔隙被水占據,氧氣擴散受阻,易形成厭氧區並增加污染。
含水率以濕基表示時:
調水後應充分混拌,使各處濕度均勻;手握培養料可作現場初步判斷,但正式配料宜以秤重控制。