113 專技高考高等考試 法醫師 法醫生物學 考古題詳解

核心觀念

本題考的是以 DNA 判定骨骸的生物種屬，也就是判斷檢體是否屬於人類。這與個體身分鑑定不同：前者回答「是否為人」，後者才進一步比對「是哪一個人」。

骨骼通常含有 DNA，但埋藏、潮濕、高溫、微生物作用等會造成 DNA 降解或污染。粒線體 DNA（mtDNA）存在於細胞內多個粒線體中，通常比單拷貝核 DNA 容易從劣化檢體取得；核 DNA 則可提供人類特異性標記或個人型別資訊。常用分析標的包括人類特異性核 DNA 標記，以及 mtDNA 的 12S rRNA、細胞色素 b（cytochrome b）等種屬辨識標記。

解題方法

作答時按「檢體處理、DNA 分析、結果判讀」說明，並指出人類特異性檢測與序列比對可相互補強：

1. 檢體前處理與取樣 清除骨骸表面附著物，採取骨皮質或緻密骨質，並以適當方式去污、乾燥及磨成骨粉，降低外來 DNA 污染。操作時設置空白對照，避免把實驗室或接觸者 DNA 誤認為骨骸來源。

2. DNA 萃取與品質評估 自骨粉萃取 DNA，並評估 DNA 的量與降解程度。若 DNA 含量低或片段短，宜選用短片段標的，降低擴增失敗的風險。

3. 選擇種屬判別標的並擴增 可採用人類特異性 DNA 引子或探針進行 PCR，觀察是否產生預期的人類特異性擴增訊號；也可擴增 mtDNA 的種屬辨識區段，再進行定序。若為混合或未知來源檢體，可將序列與已知物種資料庫比對，判斷最相符的種屬。

4. 判讀結果並控制污染 人類特異性標記呈現預期結果，且定序所得片段與人類參考序列相符，可支持檢體源自人類；若與其他動物序列相符，則支持非人類來源。陰性對照應無擴增訊號，陽性對照應有預期結果；若對照異常，該次檢驗結果不得直接採信。

解題技巧

• 先寫清楚鑑定目的：種屬判定不是個人身分鑑定。
• 談骨骸 DNA 時，要提到 DNA 劣化與污染控制；只寫「做 PCR」不足以交代法醫檢驗流程。
• mtDNA 適合劣化檢體的原因是細胞內拷貝數較多；但判讀仍須依標的序列及對照結果，不宜只憑單一訊號下結論。
• 人類特異性擴增與 DNA 序列資料庫比對，是可並用的判別方式。骨骸種屬 DNA 鑑定研究

（二）毛髮是否源自人類：型態檢驗

核心觀念

核心觀念

本題重點是依可能的性接觸部位，系統性採集被害人身上的生物性跡證，並說明每項檢體的採集方法、證明目的與後續鑑定。採證的核心原則是：先記錄與保全，再分部位採集；不同部位分開包裝；同步採集被害人參考檢體，以供排除或比對。

以命題當年（民國 113 年）法規為準。性侵害犯罪防治法規範被害人驗傷與採證等事項；本題的作答重點在法醫生物跡證的採集及鑑定流程。

解題方法

可按「衣物與體表 → 外生殖器與陰道 → 肛門與口腔 → 指甲與毛髮 → 參考檢體」的順序作答。每一類都交代三件事：如何採、為何採、如何鑑定。由於題幹未說明性交或接觸的具體方式，肛門、口腔及其他接觸部位應依案情陳述與檢查所見採集；本題假設曾有陰道性交，因此陰道檢體為核心檢體。

採證前應記錄死者身分、屍體狀態、檢查時間、可見傷勢與疑似斑跡位置，並拍照、標示。採證者更換手套、使用無菌器材，各部位分別採集，避免檢體間交叉污染。潮濕檢體應適當乾燥後以紙袋或透氣包材分裝，標明部位、時間及採證人，封緘並維持完整證物保管紀錄。

各類生物性跡證

一、衣物、床單及其他貼身物品

**採集方法：**逐件檢視被害人內衣褲、外衣及現場相關布料，記錄疑似血跡、精液斑、唾液斑或其他體液斑的位置；各件衣物分開包裝。若衣物潮濕，先在適當環境乾燥，再以紙袋包裝，避免塑膠袋造成潮濕與微生物增生。

**採集目的：**尋找加害人精液、唾液、血液、皮屑或毛髮，並保存可能的轉移跡證。衣物上的斑跡可與被害人身體採得的檢體相互印證。

**鑑定方法：**先以外觀、光源等方式檢視並標記可疑處，再依檢體性質進行篩檢，例如精液斑可作酸性磷酸酵素（ACP）篩檢及前列腺特異抗原（PSA）檢測；若檢出適合的生物材料，再萃取 DNA 進行型別分析。ACP 是篩檢工具，不能單獨作為精液確認結果。

二、外陰部、陰道口及陰道深部檢體

**採集方法：**先採集外陰部及陰道口，再採集陰道內部，尤其是陰道深部、後穹窿及子宮頸口附近。可使用無菌棉棒擦拭；必要時使用一次性鴨嘴擴張器協助採集。外陰部、陰道口與陰道深部應分開採集、分開標示，不可混成一份。可另採陰道抹片或相關檢體供顯微鏡檢查。

**採集目的：**尋找性交後遺留的精液、精子或加害人脫落細胞，以判斷是否有男性生物材料留存，並進一步取得加害人 DNA 型別。陰道深部檢體有助於保存較接近性交位置的跡證。

**鑑定方法：**先以顯微鏡觀察精子；再以 ACP、PSA 等方法篩檢精液成分。若存在精子，可分離精子細胞與女性上皮細胞後進行 DNA 萃取；混合檢體則可採差異性裂解等方式分離精子部分與非精子部分。接續以常染色體 STR 分析；若女性被害人的 DNA 量較多而男性成分較少，可採 Y 染色體 STR 增加男性 DNA 型別檢出機會。最後與被害人參考型別及嫌疑人檢體比對。

三、肛門、直腸及口腔檢體

**採集方法：**如案情或檢查顯示曾有肛交，採集肛門周圍及肛管內棉棒，分開標示；如有口交，採集口腔及相關部位棉棒。若唾液可能沾附於皮膚或其他部位，也應針對該部位另行採集。

**採集目的：**尋找精液、唾液或加害人上皮細胞，確認可能的接觸部位並取得 DNA。這些檢體能補足陰道檢體未能涵蓋的接觸途徑。

**鑑定方法：**可先作精液相關篩檢及顯微鏡檢查，再對檢體進行 DNA 萃取及 STR 分析；男性 DNA 含量低或與被害人細胞混合時，可評估使用 Y-STR 分析。

四、皮膚上的斑跡、擦傷或疑似咬痕部位

**採集方法：**先拍照、標示部位及斑跡範圍。針對皮膚上的疑似血液、精液、唾液或其他體液，以適當方式擦拭採集；需要濕式擦拭時，可用無菌水潤濕棉棒，並另取鄰近未受污染皮膚作陰性對照。

核心觀念

本題比較細胞核 DNA（nucDNA）與粒線體 DNA（mtDNA）的含量、突變率、遺傳體數目及複製時序。細胞內 mtDNA 的總量遠少於核 DNA；兩者的複製與遺傳方式也不同。

解題方法

先逐一檢視各選項是否符合兩種基因體的基本特性：mtDNA 在整體細胞 DNA 中所占比例很低；核 DNA 通常比 mtDNA 穩定；核基因體以二倍體為主，粒線體基因體則為多個拷貝；兩者複製並非同步進行。依題目所採比例判斷，只有 A 正確。

選項分析

• (A) mtDNA 約占細胞 DNA 的 0.25%：正確。 mtDNA 雖然每個細胞可有多個拷貝，但粒線體基因組遠小於核基因組，合計約占細胞 DNA 的極小比例；本題採用的估計值為約 $0.25\%$。

核心觀念

本題考定量 PCR（real-time quantitative PCR, qPCR）的引子設計，以及 TaqMan 與 SYBR Green 兩種偵測方式的原理。

引子（primer）的熔解溫度 $T_m$ 是雙股核酸解離為單股時的特徵溫度。成對引子的 $T_m$ 越接近，越容易在合適的同一退火溫度下共同作用。TaqMan 則利用帶有螢光基團與淬熄基團的探針，偵測 PCR 產物；SYBR Green 會與雙股 DNA 結合，因此也可能偵測到非特異性產物或引子二聚體。

解題方法

逐一比對選項的敘述與基本原理：

1. 檢視引子 $T_m$ 的差異是否符合常用設計原則。
2. 確認 TaqMan 探針水解所需的 DNA 聚合酶核酸外切酶活性方向。
3. 判斷 SYBR Green 是否能區分特異性與非特異性雙股 DNA。
4. 判斷 qPCR 是否能進行多重擴增（multiplex PCR）。

選項分析

(A) 2 條引子的 $T_m$ 值差異最好 $\leq 5^\circ\mathrm{C}$：正確。

一對引子的 $T_m$ 應盡量接近，才能讓兩條引子在相同退火條件下有效結合。實務設計通常會讓差異更小；「差異最好不超過約 $5^\circ\mathrm{C}$」是常見的引子設計原則。此選項符合題目採用的設計準則，因此為正確答案。

核心觀念

本題考 PCR（聚合酶連鎖反應）中，特異性目標片段何時首次形成。引子會界定目標區段的兩端；特異性產物的長度與序列，須由兩端引子的位置共同限定。

解題方法

以變性、引子黏合、延伸三步驟追蹤目標片段：

1. 第 1 循環：引子各自黏合模板並延伸。新生 DNA 的一端由引子界定，另一端的延伸長度則取決於模板長度，因此尚未形成兩端都由引子界定的目標片段。
2. 第 2 循環：前一循環產生的新股可作為模板；延伸產物開始具有由另一端引子位置界定的端點，但其互補股尚未同時具備目標片段所需的兩個界定端。
3. 第 3 循環：以第 2 循環產生的股鏈為模板延伸後，首次形成兩端皆由引子界定的雙股特異性產物。

核心觀念

一般人類體細胞為二倍體，具有 23 對、共 46 條染色體；其 DNA 量約為 6 pg。人類精子或卵子屬單倍體，DNA 量約為體細胞的一半，即約 3 pg。

解題方法

先判斷題目所稱的「一個人類細胞」通常指一般二倍體體細胞，再套用常用估值：

$$1\text{ 個二倍體人類細胞}\approx 6\text{ pg DNA}$$

單位換算為 $1\text{ ng}=1000\text{ pg}$，所以 6 pg 遠小於 1 ng。依此選出 6 pg。

選項分析

核心觀念

本題考查 Y-STR 單倍型頻率與親子鑑定統計量的區別。Y-STR 位於 Y 染色體上，父親將同一條 Y 染色體傳給兒子，因此父子通常具有相同的 Y-STR 單倍型。設資料庫中該單倍型的頻率為 $p=0.005$。

單倍型頻率可用於估算偶然相符的機率，但不能直接視為個體化識別力，也不能單憑 Y-STR 相符就確定親子關係。尤其同一父系男性親屬可能共享相同單倍型。

解題方法

以頻率 $p=0.005$ 計算相符機率與其補數：

$$1-p=1-0.005=0.995=99.5\%$$

若將親子指數簡化為「父子相符時的機率」除以「無關男性偶然相符的機率」，則：

$$PI=\frac{1}{p}=\frac{1}{0.005}=200$$

然而，「相符機率的補數」、「親子指數」、「親子關係確定率」與「鑑別力」是不同概念，不能把同一個頻率直接代換成所有統計量。

選項分析

(A) 親子排除率（Power of exclusion）為 0.995

若依本題預設算法，把不相符機率視為排除率，則：

$$PE=1-p=0.995$$

因此此選項符合題目採用的簡化計算。

(B) 親子指數（Paternity index）為 200

在此題簡化設定下，父子相符的假設下機率為 1，無關男性偶然相符的機率為 $p$，故：

核心觀念

單核苷酸多型性（SNP）是指基因體中特定位置的單一核苷酸存在不同型態。常見的 SNP 通常具有兩種對偶基因，例如某位置可為 A 或 G，因此多數 SNP 標記屬於雙等位基因標記。

SNP 的鑑定可使用 PCR 擴增目標區域，再以適當方法辨識該位置的核苷酸型態。由於 SNP 只需涵蓋目標位置周邊的短 DNA 片段，PCR 產物可以設計得很短，因此適合分析已降解、片段較短的 DNA 檢體。

解題方法

本題可從三個特性判斷：SNP 在基因體中的分布密度、單一標記的對偶基因數，以及短片段 DNA 的擴增適用性。逐項比對後，只有「短 PCR 產物適合降解 DNA」符合 SNP 鑑定的特性。

選項分析

(A) 錯誤。 人類基因體確實有大量 SNP，但「大約每 100 bp 即出現一個 SNP」把密度說得過高。常見的概略說法約為每數百個鹼基出現一個 SNP，並非每 100 bp 就有一個。

核心觀念

人類 Y 染色體大部分區域不與 X 染色體進行減數分裂重組，稱為 Y 染色體非重組區（NRY）或男性特有區（MSY），約占 Y 染色體的 95%。與 X 染色體可配對並發生重組的區域，主要是位於 Y 染色體短臂末端與長臂末端的假常染色體區（PAR1、PAR2）。

Y 染色體約有數千萬個鹼基對，異染色質則主要集中於長臂遠端（Yq），不是短臂。

解題方法

先辨認兩個結構特徵：一是可與 X 染色體重組的 PAR 區只占少數；二是大部分 Y 染色體屬非重組區，約占 95%。再檢查各選項對重組區位置、比例，以及異染色質分布的描述。

選項分析

核心觀念

Stutter（微變異）是 STR-PCR 擴增時，DNA 聚合酶滑移造成的副產物。最常見的是比主要等位基因少一個重複單位的產物，稱為「−1 repeat stutter」；例如四核苷酸重複 STR 的 stutter 產物通常比主要產物少 4 個鹼基。Stutter 峰通常位於主要等位基因峰的前方，並且強度較低。

Stutter 不是所有標記都相同的固定訊號。不同 STR 標記、等位基因長度與重複單位種類，都會影響 stutter 的發生率與比例。

解題方法

判斷關鍵在於區分兩件事：一是 stutter 產物「是否會產生」，二是它「是否會影響判讀」。Stutter 通常可依其相對於主要峰的位置、峰高比例及實驗室設定的 stutter 門檻辨認，但若 stutter 峰與真實等位基因訊號重疊或相近，仍可能造成判讀困難。因此，不能說 stutter 完全不影響結果判讀。

選項分析

核心觀念

本題考人類粒線體 DNA（mitochondrial DNA, mtDNA）的結構、拷貝數、遺傳方式，以及在法醫鑑定上的用途。mtDNA 位於粒線體內，通常為環狀雙股 DNA，單套基因組約有 16,569 個鹼基對。它具有多拷貝特性，且通常經由母系遺傳，因此常用於母系親屬比對，也適合分析 DNA 保存較差或核 DNA 含量較低的檢體。

解題方法

逐項核對四項敘述：mtDNA 的基本結構與長度、粒線體與 mtDNA 的拷貝數關係、遺傳方式，以及法醫檢體應用。判斷關鍵在於 粒線體內不只含有一套 mtDNA；題目 B 把粒線體與 mtDNA 的數量關係說得過於絕對。

選項分析

(A) 正確。 人類 mtDNA 為環狀雙股 DNA，長度約 16,569 bp。這是人類粒線體基因組的基本特徵。

核心觀念

本題考查法醫 DNA 鑑定技術的發展先後。最早成功應用於法醫案件的 DNA 分型方法，是以限制酶片段長度多型性（RFLP）分析可變數目串聯重複序列（VNTR）。這種方法比較不同個體 DNA 經限制酶切割後的片段長度差異，以建立 DNA 型別並進行身分比對。

解題方法

辨認題目問的是「第一個運用於法醫案件」的 DNA 鑑定方法，而不是現今最常用或檢測效率最高的方法。法醫 DNA 分析的發展脈絡中，早期以 RFLP 檢測 VNTR；PCR 擴增 STR 成為常規鑑定方法則是後續發展。因此，選出結合 RFLP 與 VNTR 的選項即可。

選項分析

• (A) 以 PCR-SSP 方法檢測多個 HLA 標記：錯誤。 PCR-SSP 是以序列特異性引子進行 PCR，常用於特定基因型或 HLA 標記的判定；它不是最早用於法醫案件的 DNA 鑑定方法。

核心觀念

差異萃取（differential extraction）用於混合檢體中分離精子細胞與非精子細胞（常見為陰道上皮細胞）的 DNA。方法利用兩類細胞在細胞膜與細胞核結構上的差異，先裂解較易處理的上皮細胞並取出其 DNA，再處理留下的精子細胞，以取得精子 DNA。

精子細胞核的染色質由二硫鍵交聯的魚精蛋白（protamine）緊密包裹，因此需用還原劑破壞二硫鍵，讓精子細胞核得以裂解並釋出 DNA。關鍵試劑是二硫蘇糖醇（DTT）。

解題方法

辨認題目問的是「獲得精子 DNA 的關鍵試劑」，應鎖定精子細胞核特有的染色質結構。DTT 可還原魚精蛋白中的二硫鍵，使精子染色質鬆解；因此，在差異萃取流程中加入 DTT，是釋出精子 DNA 的關鍵步驟。

選項分析

核心觀念

Chelex 萃取法常用於快速製備 PCR 檢體。Chelex 100 是螯合樹脂，可結合溶液中的二價金屬離子，尤其是鎂離子。鎂離子是許多核酸酶的輔因子；將其移除可抑制核酸酶活性，降低 DNA 降解。

解題方法

判斷各選項時，抓住 Chelex 法的兩個特點：一是樹脂螯合鎂離子、抑制核酸酶；二是操作步驟簡便，通常將檢體與 Chelex 混合、加熱，再離心取上清液供 PCR 使用。接著檢視選項是否符合其作用原理、操作方式及適用的 DNA 分析方法。

選項分析

• (A) 正確。 Chelex 可螯合鎂離子。鎂離子移除後，依賴鎂離子的核酸酶活性受到抑制，因此有助於維持 DNA 完整性。更精確地說，這是藉由抑制酵素性降解來保護 DNA，並非直接使 DNA 分子本身變得更穩定。

核心觀念

連鎖不平衡（linkage disequilibrium, LD）是指不同基因座的等位基因在族群中呈現非隨機關聯：某些等位基因組合實際出現的頻率，偏離依各自等位基因頻率推算的獨立組合頻率。對兩個基因座而言，若等位基因為 $A$、$B$，可用 $D = P(AB)-P(A)P(B)$ 表示其關聯程度；$D$ 不為零即表示存在 LD。

基因連鎖（genetic linkage）則是指不同基因座位於同一染色體上，因距離較近而較常一起遺傳。兩者相關但不等同：基因座即使彼此連鎖，也不必然在族群中呈現 LD；LD 也可能受族群歷史、族群混合及選擇等因素影響。

解題方法

本題要分辨三件事：LD 的定義、LD 與基因連鎖的差異，以及 LD 對親子鑑定統計計算的影響。注意選項 (A) 把 LD 限定成「高於」獨立期望值，但 LD 的核心是頻率偏離獨立期望值，偏高或偏低都可能；因此依精確定義判斷，(A) 不完整。HLA 基因座彼此相鄰，部分等位基因組合常共同遺傳，具有 LD；分析相關基因座時若忽略其關聯，可能影響親子鑑定的遺傳判讀或統計評估，因此 (D) 正確。

選項分析

核心觀念

本題考查 HLA class II 抗原的表現細胞，以及血清學分型法所需的細胞種類。HLA class II 抗原主要表現在 B 細胞、單核球／巨噬細胞及樹突細胞等抗原呈現細胞上；成熟 T 細胞通常不表現 HLA class II。

解題方法

血清學分型法以特定抗血清與待測細胞表面的 HLA 抗原反應來判定型別。判斷 class II 時，應選擇會表現 class II 抗原、可供抗血清辨識的細胞。選項中的 B 細胞具 HLA class II 表現，因此符合題意。

選項分析

• (A) 單核球：錯誤。 單核球可表現 HLA class II，亦可用於相關分型；但本題官方答案指定的選項為 B 細胞。單核球並非唯一可供 class II 分型的細胞，題目採用的是傳統血清學分型常用的 B 細胞。

核心觀念

Hardy–Weinberg 定律描述：在符合特定條件的族群中，對偶基因頻率與基因型頻率之間的關係。以一個有兩種對偶基因 $A$、$a$ 的位點為例，令其頻率分別為 $p$、$q$，則 $p+q=1$；平衡時的基因型頻率為：

$$p^2(AA)+2pq(Aa)+q^2(aa)=1$$

此定律可用於由已知的對偶基因頻率推算基因型頻率，也可在適當條件下，根據表現型資料推估基因型頻率。

解題方法

先辨認定律的基本公式與成立條件，再檢視選項是否符合其用途。題目問「何者錯誤」；官方答案為 (C)。關鍵在於：Hardy–Weinberg 定律並非不適用於由表現型頻率推算基因型頻率，某些情況下可以進行推估。

選項分析

• (A) 正確。 隨機交配是 Hardy–Weinberg 平衡的基本假設之一。其他假設還包括族群夠大、沒有突變、遷徙或天擇等足以改變基因頻率的因素。
• **(B) 正確。

核心觀念

Kastle-Meyer 試驗是血跡初步篩檢中的推定試驗，利用血紅素的類過氧化酶活性催化氧化還原反應。試驗通常先加入還原態酚酞試劑，再加入過氧化氫；若檢體含有血紅素，酚酞會被氧化而呈粉紅色。

此反應只能提示檢體可能含有血液，不能單憑結果確認血液來自人類，也不能取代後續確認或來源鑑定。

解題方法

抓住反應原理即可判斷：Kastle-Meyer 試驗的反應對象是血紅素所提供的類過氧化酶活性，不是抗原與抗體的專一性結合。因此它不是免疫分析；其陽性反應也不具人類血液特異性。

酚酞在此試驗中是被氧化後呈粉紅色的顯色物質，並非用來判斷酸鹼值的酸鹼指示劑。

選項分析

核心觀念

凝集法利用抗原與抗體交聯，形成肉眼或儀器可檢出的凝集。反應強弱取決於抗原、抗體的相對比例；兩者比例適當時，交聯最有效，若其中一方過量，反而可能使凝集減弱或不易形成。

抗原過量造成反應減弱或不顯的現象稱為後帶效應（postzone），可能使檢測結果呈偽陰性。抗體過量造成類似現象則稱為前帶效應（prozone）。

解題方法

判斷各選項是否正確描述「凝集反應與抗原、抗體比例」即可：反應不會隨抗原濃度無限制上升；抗原過量會妨礙抗原與抗體形成有效交聯，故可能出現偽陰性。

選項分析

核心觀念

本題考的是麗蠅幼蟲（蠅蛆）與鰹節蟲幼蟲的外部形態差異。辨認時可抓住三個特徵：頭殼是否明顯、體表是否有毛、是否具有胸足。

麗蠅幼蟲屬雙翅目，頭部退化，沒有發達的硬化頭殼，也不具胸足；鰹節蟲幼蟲屬鞘翅目，頭殼發達，體表常覆有細毛，並具有胸足。

解題方法

先依昆蟲類群辨別幼蟲型態：蠅類幼蟲呈蛆狀，缺少明顯頭殼與胸足；甲蟲類幼蟲則常可見發達頭殼及胸足。再對照選項，能完整描述鰹節蟲幼蟲「頭殼發達、體表覆細毛、具胸足」者，即為正確敘述。

選項分析

核心觀念

本題考的是類別資料的觀察次數與理論期望次數比較。哈溫平衡（Hardy–Weinberg equilibrium）會依等位基因頻率推算各基因型的期望比例；若要檢驗樣本中觀察到的基因型次數，是否與這些期望次數有顯著差異，適合使用卡方適合度檢定。

假設某基因座有兩種等位基因，頻率分別為 $p$、$q$，且 $p+q=1$，哈溫平衡下三種基因型的期望比例為：

$$p^2 : 2pq : q^2$$

若樣本數為 $N$，各基因型的期望次數即為 $Np^2$、$N(2pq)$、$Nq^2$。卡方統計量為：

$$\chi^2=\sum \frac{(O_i-E_i)^2}{E_i}$$

其中 $O_i$ 是第 $i$ 類的觀察次數，$E_i$ 是其期望次數。再依自由度與顯著水準判斷觀察結果與哈溫平衡期望是否有顯著差異。

解題方法

先辨認資料型態與問題目標：基因型是類別，資料以各類別的「人數或次數」表示；題目要比較觀察次數與依哈溫平衡推得的期望次數。因此使用卡方適合度檢定，檢驗觀察到的類別分布是否符合指定的理論分布。

核心觀念

本題考查混合 DNA 型別的判讀原則，特別是訊號是否達到分析閾值。混合樣品可能包含多人的 DNA，判讀時須參考峰值訊號、峰高比例、已知當事人的 DNA 型別，以及各種可能的等位基因組合。

「分析閾值」是判定訊號能否作為有效型別資訊的基準。低於閾值的訊號可靠性不足，不能任意拿來支持納入或排除某一來源。

解題方法

抓住 D 選項的關鍵說法：「低於閾值的訊號」竟然同時可用於排除及證明不排除。低於分析閾值的訊號不足以作為可靠判讀依據，不能用來證明某人符合混合型，也不能僅憑該訊號排除某人。故 D 是最不適當的敘述。

其餘選項描述的是混合型判讀中常見的分析方式：評估主要型、與已知當事人型別比對，以及在型別不明確時列舉可能組合進行排除判斷。

選項分析

(A) 混合樣品可以依訊號強度與強度比值判定主要型——適當。 混合樣品中不同來源的 DNA 量可能不同，可依峰值訊號強度及相關峰高比等資訊，評估是否存在主要型。但訊號強度只是判讀依據之一，仍須配合整體型別與分析標準，不宜單憑單一峰值下結論。

核心觀念

粒線體 DNA（mtDNA）主要經母系遺傳，常用於比對檢體是否與某人或其母系親屬相容。比對結果通常分為三類：

• 不能排除：兩檢體在各位置有共同的鹼基型態；不能據此認定兩者必然來自同一人。
• 不能判斷：只有一個鹼基差異時，通常列為不能判斷，因為母系傳遞過程中可能發生突變。
• 可以排除：有兩個以上的鹼基差異，且差異位置沒有異質現象時，通常可排除來自同一個體或同一母系。

解題方法

先確認比較中有幾個真正的鹼基差異，再看異質現象是否提供兩檢體的共同型態。若某一位置一方呈異質、另一方呈單一鹼基，而單一鹼基是異質型態中的其中一種，該位置仍有共同型態，不算差異。若兩方在同一位置都有異質現象，也要比較各自包含的鹼基是否相同；其他位置若仍有一個不符，整體就有一個鹼基差異，不能直接判為「不能排除」。

選項分析

核心觀念

本題考查 STR（短串聯重複序列）分型時，如何依照 Ladder（等位基因標準品）的片段長度，判讀 Off Ladder（OL，未落在 Ladder 標示等位基因位置上的訊號）。在同一座位中，相鄰等位基因的片段長度差可用來推算重複單位數；此題的 Ladder 顯示等位基因 25 與 28 相差 $12.18$ bp，代表每個等位基因級距約為 $4.06$ bp。

解題方法

先用 Ladder 的兩個已知等位基因求每級距的平均長度：

$$\frac{256.64-244.46}{28-25} =\frac{12.18}{3} =4.06\ \text{bp}$$

檢體的 25 等位基因長度為 $244.33$ bp，與 Ladder 的 25 等位基因長度 $244.46$ bp 相差 $0.13$ bp，可視為同一等位基因位置。以檢體中的 25 等位基因作為基準，OL 的級距為：

$$\frac{259.51-244.33}{4.06} =\frac{15.18}{4.06} \approx 3.74$$

因此 OL 約比 25 多 $3.74$ 個等位基因級距，最接近多 4 級，即等位基因 29；

核心觀念

本題考查低拷貝數、陳舊或降解 DNA 檢體的 STR 型別檢出，以及毛細管電泳（CE）分析時如何提高訊號。低拷貝數檢體可供分析的 DNA 模板少，常見問題是擴增訊號弱、等位基因脫落（allelic dropout）及峰高不平衡。提升檢出率可從增加有效模板、提高 PCR 產物的可偵測訊號，或改善 CE 分析條件著手。

解題方法

判斷各選項是否有助於增加檢出訊號，並特別留意 Hi-Di 甲醯胺的作用：它是毛細管電泳分析前用來溶解、變性 DNA 片段的溶液。增加其濃度會稀釋 DNA 產物，使進入毛細管的 DNA 訊號降低，因此不利於檢出。

選項分析

• (A) 增加 Hi-Di 甲醯胺濃度：錯誤，為本題答案。 Hi-Di 甲醯胺用於使 DNA 片段保持變性並供 CE 分析；提高甲醯胺比例會降低樣品中 DNA 產物的有效濃度，可能使電泳訊號更弱，無助於低拷貝數檢體的型別檢出率。

核心觀念

本題考查 STR 標記的隨機相符頻率（random match probability）。依 Hardy–Weinberg 平衡，若同一標記的兩個等位基因不同，基因型頻率為 $2pq$；若兩個等位基因相同，基因型頻率為 $p^2$。不同標記的基因型頻率相乘，即得多座位的隨機相符頻率。

解題方法

CSF1PO 的等位基因型別為 11、12，屬於異型合子，頻率為：

$$2 \times 0.02 \times 0.03 = 0.0012$$

D18S51 的等位基因型別為 17、17，屬於同型合子，頻率為：

$$0.01^2 = 0.0001$$

兩個標記的頻率相乘：

$$0.0012 \times 0.0001 = 1.2 \times 10^{-7}$$

選項分析

核心觀念

本題考查的是：枯骨遺骸進行 DNA 鑑定時，如何在可取得的骨骼中優先選擇檢體。骨骼內 DNA 的保存與檢出，會受骨骼的緻密程度、骨量、保存狀況及埋藏環境影響。一般採樣時，應優先考慮骨質較緻密、可取得足量檢材的部位，並避開容易風化或污染的表面。

本題限定遺骸僅剩軀幹，因此應在題目所列的軀幹骨骼中選出最優先者。官方答案為髖骨。

解題方法

先確認檢體選擇的目的：不是判斷性別或年齡，而是為後續 DNA 鑑定取得適當骨骼材料。接著比較各選項的骨骼大小、結構與可採樣量：

• 髖骨體積大，可提供較多骨質，並有適合採樣的緻密骨區。
• 骶骨雖也是大型骨骼，但結構含有較多鬆質骨，整體採樣條件不如髖骨適合。
• 鎖骨與胸骨柄相對較小，可取得的檢材量較少。

因此，依本題所給選項及官方答案，最優先採集髖骨。

選項分析

(A) 髖骨（Pelvis）：正確。 髖骨體積較大，能提供較多骨質供後續取樣及 DNA 萃取；採樣時可選擇較緻密的骨質部位。

核心觀念

本題考查親子鑑定中「親子關係準確率」（Probability of paternity, PP）與似然比（Likelihood Ratio, LR）的換算。LR 衡量檢驗結果在「被鑑定人是生父」的假設下，相較於「被鑑定人不是生父」的假設，出現該結果的可能性有多大。

常用換算式為：

$$PP=\frac{LR}{LR+1}$$

此式假設親子關係與非親子關係的先驗機率相同，也就是先驗勝算為 $1:1$。

解題方法

題目要求親子關係準確率達 $99.99\%$ 以上，即 $PP\geq 0.9999$。代入換算式：

$$\frac{LR}{LR+1}\geq 0.9999$$

移項可得：

$$LR\geq 0.9999(LR+1)$$ $$0.0001LR\geq 0.9999$$ $$LR\geq \frac{0.9999}{0.0001}=9999$$

因此 LR 至少約為 $10^4$。但本題給定的官方答案為 D（$10^7$）；這與上述標準換算結果不一致。

選項分析

核心觀念

親子關係指數（Paternity Index, PI）是比較兩種假設下，觀察到子女基因型的機率比：

$$PI=\frac{P(\text{子女基因型}\mid\text{系爭父親為生父})} {P(\text{子女基因型}\mid\text{隨機男性為生父})}$$

本題子女為 $14、14$，母親為 $14、15$。子女必須從母親取得一個 $14$，另一個 $14$ 則來自父親。因此系爭父親須能提供 $14$；其基因型 $14、16$ 符合。

解題方法

在父親為 $14、16$ 的條件下，他傳遞 $14$ 的機率為 $1/2$，故分子為 $1/2$。

隨機男性提供 $14$ 的機率，依本題採用的對偶基因頻率為 $p_{14}=0.05$。故分母為 $0.05$：

$$PI=\frac{1/2}{0.05}=10$$

選項分析

核心觀念

本題考查常見蛋白質顯現試劑的用途。血液是含有大量蛋白質的體液，血跡顯現可利用蛋白質與特定染劑的結合反應；但不同試劑也可能針對其他成分，例如金屬離子或胺基酸，因此要依試劑的主要用途判斷是否適合顯現可疑血跡。

解題方法

辨認各試劑的主要標的：Amido black 與 Coomassie blue 是蛋白質染色劑；Ninhydrin 主要與胺基酸反應，常用於顯現紙張上的潛在指紋。Sodium rhodizonate 則主要用於顯現鉛等金屬離子，常見用途是檢測含鉛槍擊殘留或鉛痕跡，並非血跡蛋白質的顯現試劑。因此，不適合用於顯現可疑血跡印痕的是 Sodium rhodizonate。

選項分析

• (A) Ninhydrin：錯誤選項。 Ninhydrin 與胺基酸反應產生紫色產物，常用於顯現紙張等多孔表面上的潛在指紋。它不是典型血跡顯現劑，但仍可與蛋白質中的胺基酸成分反應；

核心觀念

本題考牙齒不同組織作為 DNA 檢體的適合度。法醫 DNA 鑑定主要分析細胞中的遺傳物質；組織若缺乏細胞或細胞核，通常較難提供可供分析的 DNA。

牙釉質（enamel）成熟後是高度礦化、沒有細胞的組織，因此不適合作為牙齒 DNA 鑑定的主要檢體。牙髓、牙本質與牙骨質則都可能含有可供分析的 DNA，其中牙髓通常是重要來源。

解題方法

先辨認四個選項屬於牙齒的哪種組織，再比較其細胞特性：有細胞或細胞成分的組織可提供 DNA；成熟後無細胞的組織則最不適合。本題問的是「最不適合」，因此選出缺乏細胞的牙釉質。

選項分析

核心觀念

本題考查 STR 分型中「隨機閾值」（stochastic threshold）的意義，以及如何用訊號強度判讀同質結合型。

在某個 STR 基因座，若個體是同質結合體，兩個等位基因相同，圖譜上通常只會出現一個主要等位基因峰。但低模板量、DNA 降解或 PCR 隨機效應可能使異型合子的一個等位基因未被偵測，形成等位基因脫落（allele drop-out），使圖譜看起來也只有一個峰。

**隨機閾值（stochastic threshold）**是用來降低此類誤判風險的 RFU 門檻。只有當單一等位基因峰高於此閾值時，才可依本題所述規則研判為同質結合體。

解題方法

先區分各閾值的用途：

• 分析閾值（analytical threshold）：判斷訊號是否高於背景雜訊、可作為可辨識訊號。
• 隨機閾值（stochastic threshold）：評估低量 DNA 分型的不確定性，特別是異型合子發生等位基因脫落的風險；高於此值的單一峰，才可據以判讀為同質結合體。
• Stutter threshold：用於判讀 PCR 擴增產生的 stutter 峰。
• Cycle threshold：常見於即時定量 PCR，代表螢光訊號達到設定值時的循環數。

核心觀念

本題考查以 DNA 分型方法鑑定冷案或舊案法醫檢體中的 HLA-DQA1 型別。這類檢體常有 DNA 量少或降解的情形，鑑定方法須能分析目標基因序列的差異。

• 定序法直接讀取 DNA 序列，可辨識 HLA-DQA1 的型別差異。
• **限制片段長度多型性法（RFLP）**利用限制酶切位點差異造成的片段長度差異判型。
• **反轉點墨雜交法（reverse dot blot hybridization）**以等位基因專一性探針，辨識 PCR 產物是否與特定型別互補。
• **雙股核酸結構多型性法（DSCP／SSCP）**主要依單股核酸因序列不同而形成不同構形、遷移率也不同的原理分析；它不是本題所列可用於 HLA-DQA1 型別鑑定的方法。

解題方法

逐一檢視各方法是否具有辨識 HLA-DQA1 DNA 序列差異的機制。定序、RFLP 與反轉點墨雜交均可依序列或其所造成的分子差異判型；依官方答案，本題所列無法鑑定者為雙股核酸結構多型性法。

選項分析

(A) 定序法（Sequence）—錯誤選項

定序法可讀取 HLA-DQA1 目標區域的鹼基序列，據以判定型別。若檢體 DNA 降解，可先以 PCR 擴增適當區段，再進行定序；因此不能選此項。

核心觀念

本題考植物檢體種屬鑑定所用 DNA 標記的適用性。理想標記須能從植物檢體中穩定擴增，且在不同物種間有足夠序列差異，以利比對鑑定。植物鑑定常用葉綠體非編碼區，例如 trnL intron、trnL-trnF IGS，也常用細胞核核糖體 DNA 的 ITS 區域。

解題方法

辨別各選項的基因體來源與用途：前三者都是植物鑑定常用標記；ND6 則是動物粒線體基因的典型命名。植物粒線體相關編碼序列通常較保守，ND6 不屬於植物種屬鑑定常用的標記。因此在四者中，ND6 最不適合。

選項分析

• (A) 葉綠體之 trnL intron：錯誤選項。 trnL 基因內含子是葉綠體非編碼區，已有用於植物 DNA 條碼及物種鑑定的研究。其片段也可設計成較短區域，適用於 DNA 降解的檢體。
• **(B) 植物細胞核核糖體之 ITS：錯誤選項。

核心觀念

ABO 血型基因型可由等位基因組合判定：A、B、O 三種等位基因中，A 與 B 對 O 呈顯性。因此，OO 表現為 O 型；AO 表現為 A 型；BO 表現為 B 型；AB 表現為 AB 型。

本題以等位基因特異性 PCR 產物搭配限制酶切分析判讀：若 PCR 產物上具有特定限制酶切位，酵素反應後會被切開；若不具該切位，產物則維持未分解。

解題方法

1. 產物甲是 O 對偶基因型特異性 DNA，且具有 Kpn I 切位；以 Kpn I 反應後「完全分解」，表示該 O 型特異性產物存在。
2. 產物乙是 B 對偶基因型特異性 DNA，且具有 Alu I 切位；以 Alu I 反應後「無分解」，表示未檢出可供酵素切割的 B 型特異性產物。
3. 因此檢體具有 O 對偶基因，未檢出 B 對偶基因；在題目列出的選項中，符合此結果的是 OO 基因型。

選項分析

• (A) OO 基因型：正確。 O 特異性產物甲被 Kpn I 完全分解，表示有 O 對偶基因；B 特異性產物乙未被 Alu I 分解，表示無 B 對偶基因。檢體為 OO。

核心觀念

本題考查法醫遺傳家譜學如何利用親屬間共享的「同祖遺傳」（identical by descent, IBD）DNA 片段，推估家族成員的親疏關係。此技術最適合使用常染色體單核苷酸多型性（autosomal SNP）：在全基因組中分析大量 SNP 位點，可辨認親屬共享的 DNA 片段及其長度，據此估算親緣遠近。

解題方法

判斷關鍵在於比較各類標記能否提供全基因組、可用來推估不同親等的遺傳資訊。法醫遺傳家譜學需要大量分布於常染色體上的標記，尋找親屬間共享的 IBD 片段；親緣越近，通常共享的片段越多、越長。Autosomal SNP 數量豐富且遍布常染色體，適合進行這類比對，因此選 C。

選項分析

• (A) Autosomal STR：錯誤。 常染色體 STR 常用於個體識別及親子鑑定，但法醫實務常見的 STR 套組位點數相對有限，主要用於直接比較個體的型別，不如大量常染色體 SNP 適合進行家譜搜尋及廣泛分析 IBD 片段。

核心觀念

本題考查麗蠅（blow flies）的活動時段、群聚產卵習性，以及尋找屍體與產卵位置時所用的感官。法醫昆蟲學利用屍體上昆蟲的種類與發育情形，協助推估死後時間；判讀時須掌握昆蟲的生態習性，例如活動是否受日夜與光線影響。

解題方法

先辨認選項中哪一項與麗蠅的典型活動習性相反。麗蠅一般在白天活動，常於白天飛近屍體並產卵；夜間活動與產卵不是其典型特徵。因此，將麗蠅描述為夜行性、喜好夜間產卵的選項錯誤。

選項分析

• (A) 正確。 麗蠅常優先在人體自然開口及潮濕、容易進入或受保護的部位產卵，例如眼、鼻、口、耳及傷口處。

核心觀念

本題考查法醫昆蟲學中，蠅蛆標本的保存方式如何影響以發育程度推估死亡後經過時間（PMI）。蛆的齡期與體長可作為發育指標；估算時須將標本狀態與溫度等條件納入考量。

解題方法

抓住題幹問的「主要原因」：保存狀況會改變蛆的體長，使採集時觀察到的長度不再可靠地反映其原本的發育程度。若直接以保存後的體長對照發育資料，可能錯估齡期或日齡，進而影響 PMI 推估。因此選擇提到體長改變的選項。

選項分析

• (A) 蛆的剛毛斷裂，無法判斷齡期：錯誤。 剛毛損傷不是保存狀況影響 PMI 估算的主要原因；本題重點在保存造成的體長變化。
• **(B) 蛆的體長改變，無法估算日齡：正確。

核心觀念

本題考查法醫昆蟲學採集蛆蟲時，如何選取樣本以估算死亡時間。蛆蟲的發育速度會受種類、發育階段及環境溫度等因素影響；鑑定蛆蟲種類並判定其發育階段後，可配合溫度資料與昆蟲發育模型，推估其生長所需時間，進而協助推估死亡時間。

同一種類中，體型較大的蛆蟲通常發育較成熟，較適合用來判定發育階段及估算發育歷程。因此，採樣時應優先採取同種類中體型較大的個體。

解題方法

先抓住題目目的：採集蛆蟲是為了估算死亡時間，而不是比較屍體不同部位的昆蟲分布，也不是分析族群消長。死亡時間推估重視蛆蟲的種類與發育成熟度；在同種類樣本中，較大型個體通常提供較成熟的發育證據，故選擇體型較大的個體較符合題意。

選項分析

(A) 儘量採樣同種類體型較大個體，用以估算死亡時間——正確。 同種類蛆蟲中，較大型個體通常已達較成熟的發育階段，有助於判定發育程度並配合發育資料推估生長時間，因此較適合用於死亡時間估算。

核心觀念

本題考查法醫昆蟲學以屍體昆蟲群聚變化推估長時間死後間隔（postmortem interval, PMI）的原理。屍體分解過程會形成不同的生態環境，昆蟲會依序到達、繁殖或離開；因此，隨死後時間不同，屍體上出現的昆蟲種類與群聚組成也會改變。

「屍體昆蟲消長圖」（succession matrix）整理不同分解階段常見的昆蟲種類或群聚，可供比對現場昆蟲，協助推估較長時間的 PMI。判讀時也須考慮地區、季節及環境條件等因素。

解題方法

抓住題幹的關鍵詞「消長圖」與「長時間死後間隔」。消長圖著重的是昆蟲群聚隨屍體分解與死後時間推進而發生的種類更替，不是單純計算昆蟲數量，也不是比較日夜或溫濕度造成的差異。因此，符合題意的是「不同死後時間，屍體昆蟲出現的種類會有所不同」。

選項分析

• (A) 不同死後時間，屍體昆蟲出現的數量會有所不同：錯誤。 昆蟲數量可能隨時間改變，但數量容易受環境與現場條件影響，並非消長圖用來判斷長時間 PMI 的核心原理。

核心觀念

本題考查法醫昆蟲學中蠅蛆的形態鑑定。蠅蛆是雙翅目昆蟲的幼蟲，鑑定種類時，常觀察幼蟲末端的後氣門（posterior spiracles，又稱後氣孔）。後氣門是幼蟲呼吸系統與外界相通的構造，其形狀、裂縫數目與排列，以及周圍氣門板的特徵，常具有分類鑑別價值。

解題方法

題幹問的是「判斷蠅蛆種類」所利用的特徵。應從幼蟲階段的鑑定構造切入：成蟲常用觸角、翅或其他外部形態鑑別；蠅蛆則常檢視後氣門等幼蟲形態。因此選擇後氣門型式。

選項分析

核心觀念

本題考查法醫昆蟲學中，利用蠅蛆胃內含物進行分子檢測的目的。蠅蛆取食屍體組織後，胃內可能留有死者的細胞或 DNA；分析這些胃內含物，可用來取得死者的遺傳資訊，協助鑑定死者身分。

解題方法

先分辨檢測的對象是「蠅蛆本身」還是「蠅蛆所攝取的內容物」。題幹特別指出檢測的是蠅蛆的胃內含物，關鍵在於其中可能包含死者 DNA，因此主要目的為身分鑑定，而非辨認蠅蛆本身的種類、齡期或腸道微生物。

選項分析

• (A) 鑑定死者身分：正確。 蠅蛆取食死者組織後，胃內含物可能保存死者的 DNA。對其進行分子檢測，可取得遺傳標記並用於死者身分鑑定。