108 國軍退除役轉任公務人員三等 衛生行政 醫用微生物及免疫學 考古題詳解
第 一 題20 分
請敘述革蘭氏染色及抗酸性染色原理，並比較革蘭氏染色陽性菌、革蘭氏染色陰性菌和抗酸性染色陽性菌的特徵，如染色細菌的顏色、代表性的菌種、細胞壁結構及組分區別。
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核心觀念
本題考查兩種依細菌細胞壁性質區分細菌的染色法：革蘭氏染色與抗酸性染色。作答時須說明染色原理，再比較染色結果、代表菌種，以及細胞壁的結構與組成。
解題方法
先掌握各染色法的「保色原因」，再由細胞壁組成推導染色結果：
- 革蘭氏染色：以結晶紫和碘液形成複合物，再以酒精或丙酮脫色。厚肽聚醣層能保留複合物；外膜與肽聚醣層較薄的細菌則容易被脫色，之後接受複染。
- 抗酸性染色：以石炭酸復紅染色，利用加熱或高濃度染劑促進染料穿過富含分枝菌酸的蠟質細胞壁。抗酸菌一旦染上，即使以酸性酒精處理仍能保留染料。
染色原理與操作步驟
革蘭氏染色
典型步驟為結晶紫初染、碘液媒染、酒精或丙酮脫色、番紅或稀釋石炭酸復紅複染。
- 結晶紫初染：所有細菌先呈紫色。
- 碘液媒染：碘與結晶紫形成較大的結晶紫－碘複合物。
- 脫色：革蘭氏陽性菌的厚肽聚醣層在脫水後孔隙縮小，可留住複合物；革蘭氏陰性菌的脂質豐富外膜被有機溶劑破壞，且其肽聚醣層薄，複合物容易流失。
- 複染：已脫色的革蘭氏陰性菌吸收番紅或復紅，呈紅色或粉紅色；陽性菌仍呈紫色。
抗酸性染色
常用方法包括 Ziehl–Neelsen 法與 Kinyoun 法。典型 Ziehl–Neelsen 法以石炭酸復紅初染，接著以酸性酒精脫色，再以亞甲藍複染。加熱有助染料進入細胞壁；Kinyoun 法則以較高濃度石炭酸復紅等方式，不需加熱。
抗酸菌的細胞壁富含分枝菌酸（mycolic acid）及其他脂質，具蠟質、疏水特性。石炭酸復紅進入後不易被酸性酒精移除，因此呈紅色；非抗酸菌被脫色後接受亞甲藍複染，呈藍色。
三類細菌比較
第 二 題20 分
請解釋滅菌（Sterilization）、消毒（Disinfection）和抗菌（Antisepsis），並各舉例 2 種滅菌、消毒和抗菌之方法或藥劑。
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核心觀念
本題考查三種控制微生物的方法，主要區別在於處理對象、殺滅範圍與作用部位：
- 滅菌（sterilization）：以物理或化學方法去除或殺滅物品上所有形式的微生物，包括細菌芽孢。用於手術器械、培養基等需要達到無菌狀態的物品。
- 消毒（disinfection）：殺滅或降低無生命物體上的病原微生物，使感染風險降至可接受程度；一般不保證能殺滅所有細菌芽孢。
- 抗菌／防腐（antisepsis）：以抗菌藥劑抑制或殺滅活體組織上的微生物，常用於皮膚或傷口。抗菌劑須適合用於人體組織，不能把表面消毒劑直接當作皮膚抗菌劑使用。
解題方法
先確認作用對象是物品還是活體組織，再看要求達到的微生物控制程度：
- 要求所有微生物，包括芽孢，都被去除或殺滅，屬於滅菌。
- 處理桌面、地板或器械表面等無生命物體，屬於消毒。
- 處理皮膚或傷口等活體組織，屬於抗菌。
依這個分類，逐項列出兩種具代表性的方法或藥劑即可。
各類方法與例子
一、滅菌
滅菌的目標是使物品達到無菌狀態，例子如下：
- 高壓蒸氣滅菌：利用高溫、加壓水蒸氣破壞微生物，常用於可耐熱、耐濕的手術器械與培養基。
第 三 題20 分
請比較 T 細胞和 B 細胞之起源（Origin）、發育成熟部位（Maturation）、功能（Function）、保護反應（Protective response）、鑑別表面標誌（Distinguishing surface markers）、亞群（Subsets）以及產物（Products）。
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核心觀念
本題比較適應性免疫的兩大淋巴球：T 細胞與 B 細胞。作答時要依題目指定的七個面向逐項對照，並掌握最核心的分工：
- T 細胞主要負責細胞媒介性免疫，辨認由主要組織相容性複合體（MHC）呈現的抗原胜肽，藉細胞激素或直接殺傷執行免疫作用。
- B 細胞主要負責體液性免疫，可直接以 B 細胞受體辨認天然抗原，活化後分化為漿細胞並分泌抗體。
兩者皆源自骨髓中的造血幹細胞，並可形成記憶細胞；但成熟場所、抗原辨認方式與主要效應產物不同。
解題方法與比較
| 比較面向 | T 細胞 | B 細胞 |
|---|---|---|
| 起源（Origin） | 源自骨髓造血幹細胞，淋巴球前驅細胞移至胸腺發育。 | 源自骨髓造血幹細胞，在骨髓進行早期發育。 |
| 發育成熟部位（Maturation） | 於胸腺成熟，經正向與負向選擇，建立對自身 MHC 的辨認能力並排除強烈自體反應細胞。成熟後進入周邊淋巴器官。 | 人類主要在骨髓完成初步成熟；成熟初始 B 細胞進入脾臟等周邊淋巴器官後，還可接受抗原刺激並進一步分化。 |
| 功能（Function） | 執行細胞媒介性免疫：CD4⁺ 輔助 T 細胞協調免疫反應；CD8⁺ 細胞毒性 T 細胞殺死受感染或異常細胞；調節性 T 細胞抑制過度免疫反應。 | 執行體液性免疫：辨認抗原後活化，分化成漿細胞產生抗體，也可成為記憶 B 細胞；並能呈現抗原及分泌細胞激素。 |
| 保護反應（Protective response） | 主要對抗細胞內病原體及腫瘤細胞。CD8⁺ T 細胞可殺死帶有抗原的細胞；CD4⁺ T 細胞可活化巨噬細胞及協助 B 細胞等。 | 主要對抗細胞外病原體及其毒素。抗體可中和、調理作用促進吞噬，並活化補體；記憶 B 細胞使再次感染時反應更快。 |
| 鑑別表面標誌（Distinguishing surface markers） | 泛 T 細胞常用 CD3；T 細胞受體為 TCR。主要亞群標誌為 CD4 或 CD8。 | 泛 B 細胞常用 CD19、CD20、CD21；B 細胞受體（BCR）為膜型免疫球蛋白，成熟初始 B 細胞常表現 IgM、IgD。 |
第 四 題20 分
請比較造成新生兒或孩童腦膜炎（Meningitis）的無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）、單核細胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）、流感嗜血桿菌（Haemophilus influenzae）及腦膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis）之：
(一) 革蘭氏染色和型態。（7 分）
(二) 實驗室診斷方法（含培養及生長特性）。（7 分）
(三) 可用疫苗及預防治療方法。（6 分）
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核心觀念
本題比較四種可造成新生兒或孩童腦膜炎的重要細菌，重點是把「革蘭氏染色與形態」、「培養及生長特性」、「疫苗與預防策略」三者連結起來。快速辨認的關鍵為：無乳鏈球菌是革蘭氏陽性球菌、李斯特氏菌是革蘭氏陽性短桿菌；流感嗜血桿菌是革蘭氏陰性小球桿菌、腦膜炎奈瑟菌是革蘭氏陰性雙球菌。
解題方法
依題目三個配分項目逐一作答。實驗室診斷須同時寫出檢體、染色或快速檢驗、培養基及具辨識力的生長特徵；疫苗部分則區分「已有常規或特定族群疫苗」與「目前無常規疫苗」，再補上孕婦、接觸者或其他高風險族群的預防措施。
（一）革蘭氏染色和型態（7 分）
| 細菌 | 革蘭氏染色與形態 | 重要辨認特徵 |
|---|---|---|
| 無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae, GBS） | 革蘭氏陽性球菌，常呈鏈狀或成對排列 | 可見莢膜；β 溶血性常見，但溶血表現可不明顯 |
| 單核細胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes） | 革蘭氏陽性短桿菌或球桿菌 | 有時排列成柵欄狀；具翻滾運動性，室溫下較明顯 |
| 流感嗜血桿菌（Haemophilus influenzae） | 革蘭氏陰性小球桿菌（多形性桿菌） | 可具莢膜；有莢膜型別中，b 型（Hib）與侵襲性感染關係重要 |
| 腦膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis） | 革蘭氏陰性雙球菌 | 常呈腎形或咖啡豆形，凹面相對；具莢膜 |
（二）實驗室診斷方法：含培養及生長特性（7 分）
四者疑似腦膜炎時，常採腦脊髓液（CSF）作革蘭氏染色、培養及其他快速檢驗；依臨床狀況也會採血培養。檢體採集後應儘速送檢，避免延誤培養與治療。
| 細菌 | 染色或快速診斷 | 培養及生長特性 |
|---|---|---|
| 無乳鏈球菌 | CSF 革蘭氏染色可見革蘭氏陽性球菌；可用抗原檢測或核酸擴增法輔助 | 血液瓊脂培養，常呈 β 溶血；為兼性厭氧菌，CAMP 試驗陽性、馬尿酸水解陽性可供鑑別 |
| 李斯特氏菌 | CSF 革蘭氏染色可見革蘭氏陽性短桿菌；可用培養及核酸檢測確認 | 可在一般血液瓊脂生長，常見狹窄 β 溶血；兼性厭氧，具觸媒酶；在較低溫度仍可生長，室溫呈翻滾運動性 |
| 流感嗜血桿菌 | CSF 革蘭氏染色可見革蘭氏陰性小球桿菌；可用莢膜多醣抗原檢測及核酸擴增法 | 巧克力瓊脂培養，需 X 因子（hemin）及 V 因子（NAD）；一般血液瓊脂上不易單獨生長，可與金黃色葡萄球菌共培養出現衛星現象 |
| 腦膜炎奈瑟菌 | CSF 革蘭氏染色可見革蘭氏陰性雙球菌； |
第 五 題20 分
請比較引發人類呼吸道感染的 A 型流行性感冒病毒（Influenza A virus）及麻疹病毒（Measles virus）之：
(一) 病毒基因組、型態及特徵。（6 分）
(二) 血清型數。（6 分）
(三) 可用疫苗。（8 分）
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核心觀念
本題比較兩種有套膜、以 RNA 為基因組的呼吸道病毒，重點在於分清楚三件事：基因組是否分節、病毒表面抗原如何分類、以及疫苗的種類與組成。
流感 A 病毒的表面醣蛋白血球凝集素（HA）與神經胺酸酶（NA）決定其亞型；麻疹病毒雖有多種基因型，但只有一種血清型。因此，不能把流感 A 的「亞型數」與麻疹的「血清型數」混為一談。
解題方法
依題目三個小題逐項比較：先描述基因組與病毒顆粒，再說明血清分類方式，最後列出可用疫苗及其特性。作答時須明確指出兩者皆為有套膜的負股單股 RNA 病毒，但流感 A 的基因組分成八節，麻疹病毒則是不分節。
（一）病毒基因組、型態及特徵
| 比較項目 | A 型流行性感冒病毒 | 麻疹病毒 |
|---|---|---|
| 分類 | Orthomyxoviridae（正黏液病毒科） | Paramyxoviridae（副黏液病毒科），Morbillivirus（麻疹病毒屬） |
| 基因組 | 負股單股 RNA，分成 8 個片段 | 負股單股 RNA，不分節，全長約 15.9 kb |
| 病毒型態 | 有套膜，病毒顆粒常呈球形或多形性；核衣殼為螺旋對稱 | 有套膜，常呈球形或多形性；核衣殼為螺旋對稱 |
| 重要表面蛋白 | HA 與 NA；另有 M2 離子通道蛋白 | H（血球凝集素）與 F（融合蛋白）；不具流感病毒的 NA |
| 重要特徵 | HA、NA 基因片段可因不同病毒株共同感染而重新分配，造成抗原轉變（antigenic shift）；點突變累積可造成抗原漂移（antigenic drift） | F 蛋白促進細胞膜融合，可形成多核巨細胞；具有不同基因型，但基因型差異不代表有多種血清型 |
流感病毒的「血球凝集素」HA，與麻疹病毒的「血球凝集素」H 名稱相似，都是表面蛋白，但分屬不同病毒，且麻疹病毒不具有流感病毒的 NA。