109 高普考普通考試 養殖技術 魚病學概要 考古題詳解
第 一 題25 分
神經壞死病毒為常見的海水性魚類感染源，請詳述其外觀、基因體、病理病徵及防治方法。
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核心觀念
本題考查魚類病毒性神經壞死症（viral nervous necrosis, VNN）的病原特性與防疫。病原為神經壞死病毒（nervous necrosis virus, NNV），屬於 Nodaviridae 科、Betanodavirus 屬；疾病亦稱病毒性腦病變與視網膜病變（viral encephalopathy and retinopathy, VER）。病毒主要侵犯腦、視網膜及脊髓等神經組織，魚苗與稚魚尤其容易發生高死亡率。
作答時可依「外觀與分類、基因體、病理與病徵、防治」四部分展開，將病原特徵與神經組織病變連結，並以種苗及場區生物安全作為防治主軸。
解題方法
一、外觀與病毒特性
NNV 為小型、無囊膜、球形病毒，二十面體對稱，粒徑約 25–30 nm。病毒外殼由衣殼蛋白構成，因無脂質囊膜，對脂溶性消毒劑及環境條件的敏感性與具囊膜病毒不同；防疫時應依核准消毒程序與適當濃度、接觸時間處理，不能只憑病毒「無囊膜」就推論所有環境消毒均無效。
二、基因體
NNV 基因體為兩個分節的正股單股 RNA：
- RNA1：編碼 RNA 依賴性 RNA 聚合酶，負責病毒 RNA 複製；複製過程另可產生 RNA3，與病毒複製調控相關。
- RNA2：編碼病毒衣殼蛋白，是病毒結構蛋白的主要來源，也常作為基因型分析與分子檢測的標的。
常見基因型包括條紋竹莢魚型（SJNNV）、虎河豚型（TPNNV）、條斑星鰈型（BFNNV）及紅點石斑魚型（RGNNV）。各型在宿主適應及適宜水溫上有差異；養殖場應依魚種與當地流行情形管理，不能把所有 NNV 直接視為相同的流行特性。
三、病理病徵
NNV 具有嗜神經性，主要在腦、視網膜及脊髓造成感染與病變。
組織病理變化包括神經細胞空泡化、細胞變性與壞死，腦及視網膜可見明顯空泡病變。嚴重感染時神經組織受損，魚隻失去正常平衡與游泳控制。
臨床病徵常見於魚苗、稚魚及幼魚，包括：
- 異常游泳、旋轉或螺旋游泳、失去平衡。
- 側游、浮頭或沉底，攝食下降、反應遲鈍。
- 體色變黑或外觀消瘦。
- 嚴重時大量死亡，且幼魚死亡率可很高。
第 二 題25 分
目前商用的魚類疫苗種類有那幾種？所誘發的免疫反應分別為何？為何可以達到對抗病原的功能？
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核心觀念
本題考查魚類疫苗的種類、誘發的免疫反應，以及免疫反應如何轉化為抗病原能力。作答時先依疫苗所含的抗原形式分類，再說明它如何刺激魚體的體液免疫、細胞免疫與黏膜免疫。
魚類具有先天性免疫與後天性免疫。疫苗提供病原抗原，使免疫細胞辨識抗原並啟動專一性反應；再次遭遇相同或相關病原時，免疫反應能更快發生。魚類抗體以 IgM 為主，黏膜免疫也參與皮膚、鰓與腸道等感染入口的防禦。
解題方法
依「疫苗材料是什麼」分類，再對照「抗原如何被呈現」與「主要免疫效應」：
| 疫苗種類 | 抗原形式 | 主要誘發反應 |
|---|---|---|
| 滅活疫苗（死菌苗、死毒苗） | 經熱或化學處理失去增殖能力的完整病原 | 以體液免疫為主，產生特異性抗體；注射時常搭配佐劑 |
| 減毒活疫苗 | 毒力降低但仍能在宿主內有限增殖的病原 | 體液免疫與細胞免疫皆可誘發，抗原刺激較接近自然感染 |
| 次單位／重組蛋白疫苗 | 病原中特定蛋白、抗原片段或重組抗原 | 以抗體反應為主，也可啟動輔助型 T 細胞反應；常需佐劑增強 |
| DNA 疫苗 | 編碼病原抗原的質體 DNA | 魚體細胞自行製造抗原，可誘發抗體反應及細胞毒殺型 T 細胞反應 |
商用魚類疫苗以滅活全菌疫苗最具代表性，尤其是細菌性疾病疫苗；減毒活疫苗、次單位疫苗與 DNA 疫苗則依病原、魚種、接種途徑及核准情形使用。病毒載體、胜肽、類病毒顆粒等也屬疫苗設計形式，但作為概述題，宜先寫出上述主要類別。
免疫反應如何對抗病原
第 三 題25 分
請說明在白蝦上兩種重要的新興感染源蝦類早死症（EMS）及十足目虹彩病毒（DIV 1）的檢測方法與症狀病理現象。
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核心觀念
本題比較白蝦兩種重要病原及其診斷重點：
- 蝦類早死症（EMS）：現多稱急性肝胰腺壞死病（AHPND）。典型致病株為帶有毒力質體、可產生 PirA／PirB 毒素的副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）。診斷不能只看見弧菌或只憑肝胰腺病變，應確認病原及其毒力相關基因。
- 十足目虹彩病毒 1（DIV1）：為感染甲殼類的雙股 DNA 病毒。臨床症狀不具專一性，須以分子檢測確認，並可用組織病理作為輔助。
解題方法
依序回答「病原性質與檢測方法」及「外觀症狀與組織病理」。兩者皆會造成攝食減退、空腸胃及肝胰腺異常，但 EMS 的核心病變集中於肝胰腺小管上皮；DIV1 則以造血組織、淋巴器官及血球等處的病毒感染病變為辨識重點。
一、蝦類早死症（EMS／AHPND）
檢測方法
- 臨床及肉眼檢查：觀察池蝦是否在養殖早期發病、攝食下降及肝胰腺萎縮變色。這些現象只能作為疑似依據，不能單獨確診。
- 組織病理檢查：取肝胰腺固定切片，觀察肝胰腺小管上皮細胞急性脫落、壞死及小管結構受損。此為支持 AHPND 診斷的重要病理表現。
- 細菌分離與鑑定：由病蝦肝胰腺等樣本分離弧菌，再作菌種鑑定。只分離到副溶血性弧菌，仍不足以證明是 AHPND 致病株。
- 分子檢測：以 PCR 或即時 PCR 檢測 AHPND 毒力質體上的 pirA、pirB 毒素基因。必要時配合菌株鑑定或核酸定序，以確認檢出的病原及其毒力特徵。其他核酸擴增方法亦可作檢測用途。世界動物衛生組織的 AHPND 診斷章節列有即時 PCR、傳統 PCR、LAMP、組織病理及病原分離等方法；其中毒力基因檢測有助於區分致病株與一般弧菌。WOAH 急性肝胰腺壞死病診斷章節
症狀與病理
- 外觀症狀：攝食減少、活力降低，肝胰腺蒼白、萎縮或變小；中腸可見空腸、空胃。感染幼蝦常於放養後早期出現大量死亡，因而有「早死症」之稱。
- 組織病理：肝胰腺小管上皮細胞急性脫落、壞死，小管上皮變薄或結構崩解；病程進展時可見肝胰腺小管嚴重受損。此病變反映毒素造成肝胰腺上皮傷害。
二、十足目虹彩病毒 1（DIV1）
檢測方法
第 四 題25 分
請試述下列名詞之意涵：
（一）Thiosulfate-citrate-bile-salts-sucrose
（二）Fluorescent antibody test
（三）Megalocytiviruses
（四）Yellow head disease
（五）Eimeriorine parasites
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核心觀念
本題是魚病學名詞解釋，涵蓋細菌培養基、免疫診斷、魚類病毒性疾病，以及原蟲寄生蟲分類。作答時應把每個名詞說清楚「是什麼」、並補上其主要用途或疾病特徵，避免只翻譯英文名稱。
解題方法與名詞說明
（一）Thiosulfate-citrate-bile-salts-sucrose
此處指 TCBS 培養基，中文常稱硫代硫酸鹽－檸檬酸鹽－膽鹽－蔗糖培養基，是一種選擇性、鑑別性培養基，主要用於分離弧菌屬（Vibrio）細菌。
膽鹽及檸檬酸鹽可抑制許多非目標菌；蔗糖則供細菌發酵，並以培養基中的酸鹼指示劑顯示產酸反應。蔗糖發酵菌通常形成黃色菌落，未發酵蔗糖者通常呈藍綠色菌落。因此，TCBS 可協助初步分辨不同弧菌，但仍須配合生化或分子檢驗確認菌種。
（二）Fluorescent antibody test
螢光抗體試驗是一種以抗原與抗體專一性結合為基礎的免疫診斷方法。將螢光染料標記於特異性抗體，與檢體中的目標抗原反應後，以螢光顯微鏡觀察是否出現特異性螢光。
可用於檢測魚體組織或細胞中的病原抗原；若採直接螢光抗體法，標記抗體直接與檢體抗原結合，若採間接法，則先由未標記的一級抗體結合抗原，再以螢光標記的二級抗體辨識。試驗優點是能在組織或細胞中定位抗原；結果判讀須有適當的陽性、陰性對照，且陽性反應宜配合其他方法確認。
（三）Megalocytiviruses
巨大細胞病毒屬病毒，是虹彩病毒科（Iridoviridae）中的一群魚類病毒，具大型二十面體顆粒及雙股 DNA 基因體，可感染海水與淡水魚。
其典型病理特徵是受感染細胞顯著腫大，形成含病毒包涵體的巨大細胞；病變常見於脾臟、腎臟、鰓及其他內臟組織。代表性病毒包括紅鯛虹彩病毒（RSIV）及感染性脾腎壞死病毒（ISKNV），感染可造成全身性病變與養殖魚大量死亡。辨識重點是「虹彩病毒科、魚類、感染細胞顯著腫大」。
（四）Yellow head disease
黃頭病是蝦類病毒性疾病，主要危害對蝦，尤其是草蝦（Penaeus monodon）。